SDS-PAGE凝胶配制试剂盒优惠价

名称：SDS-PAGE凝胶配制试剂盒优惠价
产地：国产|进口
编号：SY0359
规格：30～50gels
品Pai：百奥莱博
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。

本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶，大大简化了制胶过程，本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。

产品组份：

组分名称	规格	保存方式
30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺，29:1	100ml	4℃避光
4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8	70ml	4℃
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液，pH6.8	30ml	4℃
APS 过硫酸铵	0.5g	4℃~25℃
TEMED 四甲基二乙胺	0.5ml	4℃~25℃避光

储存条件：4～25℃，有效期6个月。

注意事项
1） 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒，请适当防护。
2） APS溶液不稳定，当配制成10%溶液后，分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间，以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长，需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
3） TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。
4） 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下，可通过适当调节TEMED以及APS的用量，控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
5） 温度较低时，4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育，并在完全溶解和混匀后使用。
6） 凝胶配制过程，特别是液体混匀步骤，需尽量避免气泡的产生。
7） 在分离胶上层进行水压时需小心操作，加水速度不宜过快。
8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】；

2.按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶，制胶程序如下：
2.1 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
2.2 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免气泡产生；
2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液，对于mini胶，分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层，从而压平凝胶表面；
2.4 静置30-60min，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面，表面凝胶已聚合；

3.按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶，制胶程序如下：
3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。
3.2 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合；
3.3 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
3.5 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
3.6 静置10-20min，等待浓缩胶聚合。
3.7 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】，然后进行上样和后续的常规电泳操作。

附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度	分离范围
6%凝胶	50-150kD
8%凝胶	30-90kD
10%凝胶	20-80kD
12%凝胶	12-60kD
15%凝胶	10- 40kD

附表2. 不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系

分离胶浓度	凝胶体积(ml)	所需各组分体积（单位：ml）
		蒸馏水	30%Acr-Bis（29:1）	4×Tris-HCl-SDS 分离胶缓冲液，pH 8.8	10%APS	TEMED
rowspan=6>6%	5	2.7	1.0	1.25	0.05	0.004
10	5.4	2.0	2.5	0.1	0.008
15	8.1	3.0	3.75	0.15	0.012
20	10.8	4.0	5.0	0.2	0.016
30	16.2	6.0	7.5	0 .3	0.024
50	27.0	10.0	12.5	0.5	0.040
rowspan=6>8%	5	2.37	1.33	1.25	0.05	0.003
10	4.7	2.7	2.5	0.1	0.006
15	7.1	4.0	3.75	0.15	0.009
20	9.5	5.3	5.0	0.2	0.012
30	14.2	8.0	7.5	0.3	0.018
50	23.7	13.3	12.5	0.5	0.030
rowspan=6>10%	5	2.03	1.67	1.25	0.05	0.002
10	4.07	3.33	2.5	0.1	0.004
15	6.1	5.0	3.75	0.15	0.006
20	8.1	6.7	5.0	0.2	0.008
30	12.2	10.0	7.5	0.3	0.012
50	20.3	16.7	12.5	0.5	0.020
rowspan=6>12%	5	1.7	2.0	1.25	0.05	0.002
10	3.4	4.0	2.5	0.1	0.004
15	5.1	6.0	3.75	0.15	0.006
20	6.8	8.0	5.0	0.2	0.008
30	10.2	12.0	7.5	0.3	0.012
50	17.0	20.0	12.5	0.5	0.020
rowspan=6>15%	5	1.2	2.5	1.25	0.05	0.002
10	2.4	5.0	2.5	0.1	0.004
15	3.6	7.5	3.75	0.15	0.006
20	4.8	10.0	5.0	0.2	0.008
30	7.2	15.0	7.5	0.3	0.012
50	12.0	25.0	12.5	0.5	0.020

附表3. 5%SDS-PAGE浓缩胶配制体系

凝胶体积（ml）	所需各组分体积（单位：ml）
	蒸馏水	30%Acr-Bis（29:1）	4×Tris-HCl-SDS 浓缩胶缓冲液，pH 6.8	10%APS	TEMED
2	1.14	0.34	0.5	0.02	0.002
4	2.28	0.68	1.0	0.04	0.004
6	3.42	1.02	1.5	0.06	0.006
8	4.56	1.36	2.0	0.08	0.008

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