北京百奥莱博专业生产销售基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)厂家
规格:50次
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:YT013
本试剂盒是非常先进的基因组DNA抽提试剂盒。可以抽提动物组织、鼠尾、培养细胞、细菌、酵母、动物血液、昆虫以及固定组织的包括基因组DNA在内的总DNA。一个试剂盒通过说明书中提供的不同操作方法,可以抽提除植物样品外的几乎所有样品中的总DNA。
样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯*(代'仿')抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA的长度Z长可达50kb左右,平均为30kb左右,Z短为100bp的DNA也可以被纯化。如需获得更长的基因组DNA,对于哺乳动物样品,包括组织或细胞等,可以使用百奥莱博的(YT012)哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒。通过本试剂盒获得的总DNA,OD260/OD280的范围通常在1.7至1.9之间。
本试剂盒可以抽提少至数百个细胞,多至25mg组织、0.5-1cm鼠尾、500万个培养细胞、20亿个细菌或5000万个酵母。样品用量过多,反而会影响抽提效果。如果待抽提样品的DNA含量小于5ng,建议加入适当量的carrier DNA,例如poly-dT或其它对后续实验没有干扰的DNA,也可以加入适当量的carrier RNA,例如yeast RNA等,以改善抽提效果。
本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA会含有少量RNA,但如果按照可选步骤加入RNase A,就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。含有RNA的总DNA可以用于PCR,但对于某些其它的后续反应可能会产生一些影响。
纯化柱对于DNA的容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA,每1.2cm小鼠尾尖或0.3cm大鼠尾尖可以获得10-25微克总DNA。本试剂盒可以抽提50个样品的总DNA。
产品组份:
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I————————21ml (次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II———————16ml (次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液————————22ml
蛋白酶K————————1.1ml
DNA纯化柱及废液收集管————50套
储存条件:室温,有效期一年。(蛋白酶K需-20℃保存)
注意事项:
1.抽提细菌、酵母样品时还需要一些特定的试剂,详情请参考相关实验步骤。
2.如需制备不含RNA的高纯度总DNA,需自备RNase A。
3.温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。
4.次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
5.本试剂盒需使用55℃水浴,请提前作好准备。
6.除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
7.本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
8.废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
9.参考使用说明,从某些样品中抽提总DNA不需要使用样品裂解液A。
基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)厂家正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·抗氟离子酸性磷酸酶检测试剂盒
编号:YT370
英文名称:Fluoride Resistant Acid Phosphatase Assay Kit
规格:120次
本试剂盒是一种用于快速检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的抗氟离子酸性磷酸酯酶活性的试剂盒。本试剂盒包括标准品和空白对照,本试剂盒共可进行120个样品的检测。
试剂盒组份:
检测缓冲液———————————15ml
显色底物————————————2管
氟离子溶液———————————1ml
p-nitrophenol溶液(10mM)—————0.1ml
反应终止液———————————20ml
酸性磷酸酶也称酸性磷酸酯酶,在酸性条件下可以催化磷酸酯键的水解。酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分为两类,一类为抗酒石酸酸性磷酸酶,一类为抗氟离子酸性磷酸酶。
抗氟离子酸性磷酸酶包括在绝大多数细胞的溶酶体中表达的溶酶体酸性磷酸酶、前列腺、脑、肝脏、和血小板中表达的酸性磷酸酶。抗氟离子酸性磷酸酶在前列腺中的表达水平非常高,当前列腺发生癌变并出现转移时抗氟离子的前列腺特异性酸性磷酸活性水平。当前列腺发生病变时会导致血液中抗氟离子酸性磷酸酶活性显著升高。同时,血液中检测到抗氟离子酸性磷酸酶活性升高时,通常是前列腺发生病变。因此,血清或血浆中抗氟离子酸性磷酸酶活性水平的升高,常被用作前列腺癌等前列腺病变的指标。溶酶体储存性疾病如Gaucher's disease等,也会导致血液中抗氟离子酸性磷酸酶活性水平一定程度的升高。
Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下,呈黄色产物,可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深,说明酸性磷酸酶检活性越高,反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。在适量的氟离子存在的情况下进行酸性磷酸酶的活性检测,检测得到的酸性磷酸酶活性就是抗氟离子酸性磷酸酶活性。
注意事项;
1. 如果希望进行酶活性的定量,进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间,以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高,则可以预先适当稀释样品。
2. 样品溶液中须避免出现各种酸性磷酸酶YZ剂。
3. 一管显色底物配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测,以避免试剂盒浪费。
储存条件:-20℃,有效期一年。
基因组DNA小量提取试剂盒(适用于动物组织/细菌/昆虫)厂家
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