名称:北京C端Myc标签融合蛋白质粒厂家
品Pai:百奥莱博
规格:1μg
产地:国产|进口
英文名:C-Myc plasmid(with CMV promoter)
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达C端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以GX启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Myc标签的序列,因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
multiple cloning site | 680-740 |
c-Myc tag | 741-770 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 823-844 |
SV40 polyA signal | 856-1239 |
f1 origin of ss-DNA replication | 1377-1681 |
bla promoter | 1706-1830 |
SV40 promoter | 1850-2188 |
neomycin/kanamycin resistance ORF | 2223-3014 |
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal | 3015-3473 |
pUC origin | 3602-4269 |
本质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
更多有关
北京C端Myc标签融合蛋白质粒厂家的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·ATP检测试剂盒
编号:YT361
英文名称:ATP Assay Kit
规格:200次
本试剂盒可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备,检测灵敏度高达1nmol/L,化学发光可以持续稳定达30分钟,并且获得的样品还可以同时进行Western检测。本试剂盒的使用方便快捷,通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。一个包装的本试剂盒至少可以检测200个样品。
试剂盒组分:
ATP检测试剂—————————2ml(0.5ml/管,共4管)
ATP检测试剂稀释液——————20ml
ATP标准溶液(0.5mM)——————0.1ml
ATP检测裂解液————————100ml
ATP作为Z重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液,简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高氯酸或三氯乙*(代'酸')(TCA)抽提,或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。
本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。 当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时,在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。本试剂盒在样品体积为100微升时可以检测浓度低达1nmol/L的ATP。而常规的细胞或组织裂解液中ATP的浓度仅为0.1-1μmol/L,一些常见细胞的细胞内ATP水平约为10nmol/mg蛋白。并且本试剂盒的检测浓度范围非常大,检测上限可以高达10μmol/L,并在5nmol/L-10μmol/L范围内可以形成良好的标准曲线。
本试剂盒进行了特殊的优化设计,使检测ATP时的化学发光非常稳定。对于ATP标准曲线的检测结果显示,在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降,开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。
使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品,不仅可以用于ATP检测,还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。
注意事项:
1. ATP检测试剂中含有荧光素酶,反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试ATP检测试剂反复冻融5次对于其检测效果无明显影响,为取得较好的使用效果,建议用户使用时的冻融次数不宜超过3次。ATP检测试剂稀释成ATP检测工作液后,Z好一次用完,不宜冻存后再使用。
2. ATP特别是裂解后样品中的ATP在室温不太稳定,需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可以稳定长达6小时。
3. 本试剂盒需使用luminometer,即化学发光仪(检测荧光素酶报告基因时所用的仪器)。如果没有luminometer,也可以使用液闪仪。液闪仪的测定效果取决于液闪仪的检测灵敏度和检测精度。
4. 使用可检测化学发光的多功能酶标仪时,所用96孔板宜为孔和孔之间不透光的黑板或白板。如使用常规的透明96孔板,需特别注意正确设置酶标仪测定时板子的类型,同时也可以在检测孔之间设置间隔孔,以尽量避免邻近孔之间的相互干扰。
5. 本试剂盒提供的ATP检测裂解液可以有效裂解并释放常见的培养细胞和组织中的ATP。对于一些特殊的组织或样品,如果发现检测出来的ATP水平显著低于预期水平,可以在裂解样品后并且在离心前,取部分样品煮沸2分钟以充分释放ATP。煮沸后样品中的蛋白会变性,从而会在后续的离心步骤中被沉淀,因此煮沸的样品不能用于蛋白浓度测定、SDS-PAGE和Western检测。可以使用剩余的部分样品进行蛋白浓度测定、SDS-PAGE和Western检测。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
北京C端Myc标签融合蛋白质粒厂家