pGL6报告基因质粒 克隆与表达

名称：pGL6报告基因质粒 克隆与表达
英文名：pGL6 Reporter gene plasmid
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：1μg
pGL6报告基因质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的 pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到。

pGL6主要用于在其多克隆位点插入特定的启动子、增强子等调控元件研究 该调控序列的基因转录调控活性。pGL6质粒的主要信息如下：

Base pairs	5588
Multiple cloning region	1-59
luc2 reporter gene	89-1741
SV40 late poly(A) signal	1776-1997
SV40 early enhancer/promoter	2045-2463
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor)coding region	2488-3282
Synthetic poly(A) signal	3307-3355
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3422-3441
ColE1-derived plasmid replication origin	3679
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4470-5330
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5435-5588
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5537-5556

pGL6质粒的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 用于插入调控序列：在多克隆位点选取适当的酶切位点，经酶切处理后连入适当的基因转录调控序列。pGL6也可以用作报告基因检测时的阴性对照。
3. pGL6质粒以及以此质粒为模板构建的质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。

储存条件：-20℃。

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·凝胶迁移试剂盒(EMSA试剂盒)
编号：YT185
英文名称：EMSA/Gel-Shift Kit
规格：100次
本试剂盒是用于EMSA(也称gel shift)研究的一个试剂盒。通过EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况，从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。本试剂盒提供了进行EMSA实验的探针标记、蛋白和DNA结合以及EMSA上样等的主要试剂，使EMSA实验变得简单方便。

试剂盒组份：
T4 Polynucleotide Kinase————————————100U
T4 Polynucleotide Kinase Buffer(10X)——————100μl
Nuclease-Free Water——————————————1ml
探针标记终止液—————————————————100μl
5M 醋酸铵———————————————————600μl
EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)——————————200μl
EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(蓝色，10X)——————200μl
EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(无色，10X)——————200μl
TE———————————————————————1ml/管，共2管

EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X)中含有poly(dI-dC)等有效成分。其中poly(dI-dC)的浓度经过优化，可以很好的消除蛋白和标记探针间的非特异性结合，同时又不会减弱目的转录因子和标记探针间的结合。

每个EMSA/Gel-Shift试剂盒足够标记10-20次探针，足够进行100个蛋白和探针的结合反应。

注意事项：
1. 需自备待标记的EMSA探针，需自备用于探针标记的同位素，需自备EMSA胶配制的相关试剂。
2. 细胞核蛋白的抽提可以使用百奥莱博的细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(YT041)。
3. 如需做super-shift，需自备用于super-shift的抗体。
4. 本实验涉及到同位素的操作，请严格按照同位素的相关管理条例进行操作。

储存条件：-20℃，有效期一年。


pGL6报告基因质粒 克隆与表达