名称:北京现货微球菌核酸酶厂家
英文名:Micrococcal Nuclease
产地:国产|进口
规格:5000U
产品简介:
Micrococcal Nuclease(微球菌核酸酶)是一种内切核酸酶,作用于单链及双链核酸,生成3′磷酸末端。对单链核酸的作用较好,能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+,其催化作用需要Ca2+的存在。 本酶主要用作:
1. 细胞粗抽提液中核酸的水解。
2. 为制备核小体(Nucleosome)时消化分解染色质(Chromatin)。
纯度:
1. 50 U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下,37℃反应10分钟,DNA的电泳谱带不发生变化。
2. SDS-PAGE: >95%。
使用及效果:
DNA的片段化
1. 在微量离心管中配制下列反应液。
DNA 100μg
10×Buffer 5 μl
Micrococcal Nuclease 2U
dH2O up to 50 μl
2. 37℃反应数分钟(通过预实验确定具体反应时间)。
3. 加入5 μl的 200 mM EGTA(或 EDTA)停止反应。
4. 加入5 μl(1/10量)的 3 M NaOAC(pH5.2)。
5. 加入125 μl( 2.5倍量)的冷无水乙醇,-20℃放置30~60分钟。
6. 离心回收沉淀,用70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
备注:
本酶的活性严格依赖于Ca2+的存在,用EDTA或EGTA可以终止反应。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ) ,是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到,可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内,微球菌核酸酶均有活性,无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物,其Z适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA和RNA底物产生带有 3' 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。
活性单位定义:
以热变性小牛胸腺DNA作底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟生成1OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
Buffer成分:
储存Buffer:Tris-HCl(pH8.0)50mM,NaCl50mM,DTT1mM,Glycerol50%。
反应Buffer,10×:Tris-HCl(pH8.0)200mM,NaCl50mM,CaCl225mM。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/3/%E7%94%9F%E5%8C%96%E8%AF%95%E5%89%82%20(118).jpg)
北京现货微球菌核酸酶厂家正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·酵母电转感受态细胞制备试剂盒
编号:BTN81201
英文名称:Yeast Electro Competent Cell Preparation Kit
规格:20次
产品简介:
本酵母电转感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,GX快速制备酵母电转感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品,它具有下列特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用。
2.操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要10分钟。
3.试剂盒含GX转化液,即开即用。
4.得到的感受态细胞的转化效率在0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。
5.适用于各种实验用酵母菌株,包括S.cerevisiae、C.albicans、S.pombe、Pichia pastoris 等。也可用于携带有选择性质粒的酵母。
6.得到的感受态细胞可即刻转化各种线性或环状酵母穿梭质粒,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于定点突变(Site-Directed Mutagenesis)、基因破坏(GeneDisruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)、酵母双杂交系统等实验。
使用及效果:
将一个酵母菌落接种到10 mL的YPAD培养基中,30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,离心弃上清后再用5 mL溶液A洗涤,再用2 mL溶液A将菌体重悬,然后按每管100 μL分装,放-80℃保存。
运输及保存:
常温,有效期一年。
·柱式软体动物RNAOUT
编号:BTN101113
英文名称:Column Mollusk RNAOUT
规格:50次
产品简介:
本产品专门从各种软体组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软体组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。本产品具有下列特点:
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物动物,包括螺类、贝类、乌贼、章鱼和蜗牛等。
2.能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
3.RNA产率一般为5-15 ug/100 mg。
4.操作简单,整个提取过程一般只需要10多分钟。
5.得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA纯化、PrimerExtension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
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