一步法(快速/无缝)克隆试剂盒价格

名称：一步法(快速/无缝)克隆试剂盒价格
品Pai：百奥莱博
英文名：One Step Pcr Cloning Kit
规格：25T
产地：国产|进口
一步法（快速/无缝）克隆试剂盒是一款简单、快速、GX的DNA定向克隆产品，该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点，可GX克隆50 bp～10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列，使得插入片段PCR产物5’和3’Z末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp～20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合，在重组酶Exnase的催化下，仅需反应30 min即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase，Exnase中添加了独特的重组增强因子，显著提高重组克隆效率，即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现GX克隆 (100 cfu/ng Vector)，而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

一步法（快速/无缝）克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。

产品组份：
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备；
2) 插入片段扩增引物设计；
3) 插入片段PCR扩增；
4) 进行重组反应；
5) 反应产物转化、涂板；
6) 克隆鉴定。


图一 实验流程概览

注：插入片段PCR扩增时，引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记)，使得扩增产物5’和3’Z末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。

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·吖啶橙/EB检测试剂盒
编号：SY0576
英文名称：Acridine Orange/Ethidium Bromide(AO/EB) Assay Kit
规格：1Kit
本试剂盒主要通过将吖啶橙和EB结合染色的方式检测细胞凋亡情况，主要原理是：吖啶橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。经AO和EB双染后，在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：
①正常细胞（normal cells），核染色质被AO着均匀绿色并呈正常结构分布于细胞ZY；
②早期凋亡细胞（early apoptotic cells），核染色质被AO着绿色在细胞的一侧呈月牙状或颗粒状；
③晚期凋亡细胞（late apoptotic cells），核染色质被EB染色为橘红色倾斜于细胞内部并呈固缩状或圆珠状；
④坏死细胞（Necrotic cells），表现为细胞体积增大，核染色质被EB着色为橘红色，细胞轮廓模糊，细胞即将瓦解。

本产品AO、EB溶液浓度分别为100µg/ml，所含稳定剂不影响实验效果。

注意事项
1）AO、EB均为诱变剂，可与DNA结合，操作时务必小心谨慎！
2）含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：4℃避光，有效期一年。


一步法(快速/无缝)克隆试剂盒价格