磁珠动物DNAout

 数量：大量
保质期：一年
保存条件：磁珠4℃保存，蛋白酶K溶液-20℃保存（勿反复冻融）
规格：50次

磁珠动物DNAOUT添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA－Taq来扩增PCR这些在我也都做过，不过都正如你所说，都是直接扩增基因组或cDNA.

而高GC含量影响反转录也是肯定的，因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构，这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录，有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail，磁珠动物DNAOUT这个病毒的全基因组一样被测序出来”，但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦，人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如，对高GC含量的模板测序会比较困难吧，可是你到网上搜一搜，高GC含量的区域多的是，不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗？我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧？我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的，因为无论是筛库还是RACE，都是只能拿到此区域的相邻3’区，而可以肯定的是，所得到的一定不是全长，可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献，可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录，而不是PCR。

磁珠动物DNAOUT首先检查一下你的基因片断大小以及回收量（应该不是很大，所以回收的量很可能太少），太小的片断不容易连，如果是这样建议使用好的感受态，或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外，波长是否小于314nm，如果是建议使用314以上的，并且操作时间尽量减短。第三，建议将回收产物普通Taq加A，不需回收，再连一次。，检查一下感受态。还有，如果T－easy存放时间过长，建议使用新的。 

难度不出很大。磁珠动物DNAOUT如果诱变的位点在基因中间，你可以用一个突变引物先引入突变；然后用这个突变体做一侧的引物（大引物），与另一个引物一起，以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。

 ZM202-150bp Plus（条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000）50TZOMANBIO

ZM202-250bp Plus（条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000）500TZOMANBIO

ZM203-1100bp DNA Marker（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500）50TZOMANBIO

ZM203-2100bp DNA Marker（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500）500TZOMANBIO

ZM204-1100bp Plus（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000）  50TZOMANBIO

ZM204-2100bp Plus（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000）  500TZOMANBIO

ZM205-1200bp（条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000）50TZOMANBIO

ZM205-2200bp（条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000）500TZOMANBIO

ZM206-1250bp（条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000）50TZOMANBIO

ZM206-2250bp（条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000）500TZOMANBIO

ZM207-1300bp（条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000）50TZOMANBIO

ZM207-2300bp（条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000）500TZOMANBIO

ZM208-1500bp（500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000） 50TZOMANBIO

ZM208-2500bp（500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000） 500TZOMANBIO

ZM301-11kb  DNA Marker（条带1000.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000）50TZOMANBIO

ZM301-21kb  DNA Marker（条带1000.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000）1000TZOMANBIO

ZM302-11kb Plus（条带300.500.800.1000.1500.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000）50TZOMANBIO