货号:
XY-TE-0219
供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
数量:
860
英文名:
Column Animal DNAout
保质期:
两年
保存条件:
常温运输和保存
规格:
50 次
磁珠动物DNAout产品及特点:
本产品在xuanya动物DNAOUT基础上改良而得的柱式升级产品,主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
磁珠动物DNAout跟动物DNAOUT相比,它具有下列特点:
1.DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2.DNA产率一般在200ug/g左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4.操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
5.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
磁珠动物DNAout运输及保存:
常温运输和保存、有效期一年。
自备试剂:氯仿(也可省略,但产量会降低)
磁珠动物DNAout使用方法
注意:溶液A容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1.根据使用材料的不同进行下列操作:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加0.8mL预热的溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg。
d)对DNALOCKER保存组织:先用纸吸去DNALOCKER液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2.加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
3.65℃水浴5-10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10-20%。
4.加入0.2mL自备氯仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5.12000-15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
7.每个管中加入1.5倍体积的溶液C,充分颠倒混匀。
磁珠动物DNAout8.分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
9.加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10.加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
11.12000-15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13.将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100uLDNA洗脱液2.0,室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14.12000-15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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温馨提示:不可用于临床ZL。