磁珠动物DNAOUT产品及特点
本产品是利用磁珠的方法专门用于提取动物组织基因组DNA的试剂盒,所含生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的目的物质。其操作流程如下:
本试剂盒所含磁珠微粒可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,从而达到分离纯化DNA的目的。它具有下列特点:
1. 快速简捷,一般可在36分钟内完成。
2. 所得DNA纯度高, OD260/OD280一般达1.7-1.9。
3. DNA得率高,使用100 uL磁珠微粒,产率为8-30ug/10mg。
4. 长度可达20kb - 50kb,可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。
5. 不使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤,而且省去了离心步骤。
6. 性价比高,质量与进口试剂盒相当,但价格更便宜。
磁珠动物DNAOUT产品及特点
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,YZRNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。
磁珠动物DNAOUT使用及效果
将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。
1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。
2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。磁珠动物DNAOUT更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。
3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。
4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。
5. 内源RNA酶的污染:YZ剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。
磁珠动物DNAOUTRNA提取得率低
1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。
2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。
XY3071 血液RNAOUT 50次|250次
XY71202 柱式血液RNAOUT 50次
XY80902 大提柱式血液RNAOUT 5次
XY80929 液体样品RNAOUT 50次|250次
XY70401 软骨RNAOUT 50次
XY101121 柱式软骨RNAOUT 50次
XY81102 石蜡包埋组织RNAOUT 30次
XY81220 柱式昆虫RNAOUT 50次
XY101113 柱式软体动物RNAOUT 50次
XY101109 柱式粪便RNAOUT 50次
XY130829 细胞蛋白质-RNA双提取试剂盒 50次
XY3080 植物RNAOUT 50次|250次
XY71203 柱式植物RNAOUT 50次
XY90404 柱式植物RNAOUT 2.0 50次
XY80903 大提柱式植物RNAOUT 5次
XY120503 柱式藻类RNAOUT 50次
XY90704 土壤RNAOUT 50次
XY90705 柱式土壤RNAOUT 50次