过表达慢病毒构建及包装实验外包
过表达慢病毒产品,将客户的目的基因CDS序列转接到慢病毒载体上,通过包装获得过表达目的基因的慢病毒颗粒;
慢病毒(Lentivirus, LV)属于逆转录病毒科,为RNA病毒。经过改造的慢病毒作为外源基因载体,具有其独特的特点和优势。慢病毒载体作为一种特殊的逆转录病毒载体,具有可感染分裂细胞及非分裂细胞、转移基因片段容量较大、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点,已成为当前基因ZL载体研究的热点。
慢病毒载体有下列优点:
(1)的转染效率:可非常GX地把基因转染到活体模式生物和的哺乳动物细胞中,包括分裂和不分裂的细胞。不分裂细胞处于不活跃或者停止生长的状态,非常难转染,例如神经元细胞、原代细胞、干细胞等,针对这类细胞慢病毒载体的转染效率接近。
(2)稳定长效的表达:载体带有可进行GX率的包装、转染并稳定整合进靶细胞的基因组中的序列元件,目的基因参与细胞的基因重组,形成稳定遗传物质,使得目的基因在细胞中可稳定长期表达。
(3)高安全性,低免疫原性:病毒载体自身灭活,无病毒的复制。上海世翱提供的慢病毒表达载体是自身复制灭活的,由于细胞不带有病毒外壳基因,转染后的细胞并不能产生病毒粒子。此外整合进基因组后导致5’-LTR启动子失活,阻止了慢病毒的复制。
(4)可调控表达:可控表达一直是载体研究的一个重要方向,经过特定的元件修饰的慢病毒表达载体,可实现只有在特定的外源或内源物质的作用下才能产生表达,从而调控目的基因的定时、定量表达。
上海剑钝提供过表达慢病毒构建及包装实验外包:各种报告基因(GFP、RFP、mCherry、Luciferase、Egfp-Luciferase等)或标签(FALG、HA、His等)或抗性(Puromycin、Zeocin)的慢病毒,纯化后的病毒滴度可以达到 1×108 - 1×1010 TU/ml,可以满足细胞水平研究所需病毒量和满足瘤内注射需要量不同规格病毒扩增滴度。技术服务包括:过表达慢病毒构建与包装、RNA干扰慢病毒构建与包装、miRNA过表达慢病毒构建与包装、miRNA封闭慢病毒构建与包装。