可保种型蓝白 T 载体50ng供应详细介绍:
产品及特点:
可保种型蓝白 T 载体50ng供应本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
规格及成分:
使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
MLTC-1 小鼠间质细胞瘤细胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤细胞
人表皮血管内皮细胞(HDMEC)( 5×105 )
人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠肾小管上皮细胞完全培养基 100mL
小鼠垂体瘤细胞;GT1-1
EDA2R Others Human 人 EDA2R / XEDAR / TNFRSF27 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人淋巴内皮细胞RNAHLEC miRNA5 μg
小鼠垂体细胞(MPC)(5×105)
山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1
小鼠色素瘤瘤株;B16 小鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL
H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源) Rattus
EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS
原代单核细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml
Ketr-3细胞,肾癌(瘤株) 人内膜癌细胞,RL95-2细胞 人肠血管内皮细胞总RNAHIMEC tRNA
非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS
CD40 Others Canine 狗 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
原代单核细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml
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非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
脑心浸出液肉汤(BHI)GB标准250g用于金黄色葡萄球菌的纯化培养
PseudomonasCFCSelectiveAgaradditives
卫矛醇半固体琼脂 Dulcitol Semisolid Agar 10 生化培养基,用于细菌卫予醇发酵试验(SN标准)
incubationmedia
BufferedPeptoneWater
真菌培养基250g用于药品,生物制品霉菌无菌试验(GB标准)
半固体布氏肉汤(含0.18%琼脂) 250(g) incubation media 半固体布氏肉汤(含0.18%琼脂) 250(g)
BS琼脂 Bismuth Sulfite Agar 250克 用于食品中沙门氏菌的检验
我妻氏培养基基础250用于神奈川现象试验(SN标准)incubationmedia我妻氏培养基基础250用于神奈川现象试验(SN标准)
Iodinesolution
IronAgar
028982A BR 10 kg incubation media 028982A BR 10 kg
谷氨酸棒状杆菌 支/瓶
SOB培养基250用于基因工程菌大肠杆菌培养
无机盐培养基 250g 用于纺织品防霉性能测试
可保种型蓝白 T 载体50ng供应GN增菌液2350g用于革兰氏阴性菌的选择性培养,特别是志贺氏菌和沙门氏菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4..
西红柿汁琼脂 (CM0113) Oxoid incubation media 西红柿汁琼脂 (CM0113) Oxoid
荨麻青霉 模式菌株 支/瓶
22gar
煌绿琼脂培养基 250g 用于沙门氏菌(除伤寒沙门氏菌和志贺氏菌外)分离培养