可保种型蓝白 T 载体50ng供应规格及成分:
可保种型蓝白 T 载体50ng供应产品及特点:
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H838(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
烬灰链霉菌 Micromonospora cinereogriseus
人急性混合型白血病细胞英文名称:HAL-01
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
暂无 Escherichia coli
苏云金芽胞杆菌杀虫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA Kit
人乙酰肝素酶(HPA)ELISA Kit
人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA Kit
山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KIT
兔胰淀素(Amylin)ELISA Kit
兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA Kit
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA Kit
小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit
小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA Kit
小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA Kit
小鼠抗IgE受体抗体ELISA Kit
小鼠凝溶胶蛋白(Gelsolin)ELISA Kit
小鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit
小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA Kit
鸭白介素1(IL-1)ELISA Kit
NCI-H358(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
热带假丝酵母 Candida tropicalis
小鼠腮腺细胞完全培养基100mL
大鼠胎儿成纤维细胞完全培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae