即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次供应产品及特点:
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次供应规格及成分:
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次供应详细介绍:
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次供应使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
LM-8 小鼠骨肉瘤
BxPC-3, 人原位腺癌细胞株
人脊髓星形胶质细胞(HA-sp)(1×106)
人类原巨核细胞型白血病细胞;UT-7 大鼠膀胱上皮细胞完全培养基 100mL
小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人淋巴内皮细胞总RNAHDLEC tRNA
小鼠海马趾星形胶质细胞(MA-h)(5×105)
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0
小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP 小鼠晶状体上皮细胞完全培养基 100mL
EPC, 大鼠血管内皮祖细胞 Rattus
GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人神经系统周边细胞 (HPNC)( 5×105 )
615小鼠癌瘤株;Ca761
T24, 人膀胱癌细胞
人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL
Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
615小鼠癌瘤株;Ca761
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CM-M021小鼠上皮细胞完全培养基100mL
EC97076细胞,人食管癌细胞 人神经母细胞瘤细胞,IMR-32细胞 狗肾恶性组织细胞增生症细胞;DH82
Caov-3(人乳突状卵巢腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CD34 Others Human 人 CD34 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
含225ml7.5%钠肉汤均质袋用于金黄色葡萄球菌的选择性增菌培养
PyridoxineYmedium
现隐肉汤 Presence Absence Broth 250 用于水中大肠菌计数(US-EPA方法)
MS维生素500L/瓶用于制备MS培养基incubationmediaMS维生素500L/瓶用于制备MS培养基
PhosphateBufferedSaline
支原体琼脂培养基(含精酸)250g用于支原体的分离培养
检定用培养基 250(g) incubation media 检定用培养基 250(g)
乳糖蛋白胨培养液 250g 用于水中多管发酵法或滤膜法测定大肠菌(GB/T5750.12-2006和GB/T8538-2008)。
0.水0.ptoneBrother用于制备药品样品的稀释液或冲洗液
Bufferedglycerol-SodiumChlorideSolution
磺胺钠溶液每支添加于HB0256中
0.1%蛋白胨水 0.1% Peptone Water 用于制备样品稀释液
多功能吐温琼脂 APT Agar 250克 乳酸菌分离培养
哥伦比亚CNA琼脂基础用于分离革兰氏阳性球菌(Acumedia方法)incubationmedia哥伦比亚CNA琼脂基础用于分离革兰氏阳性球菌(Acumedia方法)
亚铋琼脂(BS) 250g 用于沙门氏菌的选择性分离(GB、SN标准)
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS)20 次供应MUG营养琼脂(NA-MUG)用于滤膜法检测生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌
WILKINS-CHALGREN琼脂 WILKINS-CHALGREN Agar 用于厌氧菌的分离培养
土霉素葡萄糖酵母粉琼脂基础 OGY Agar 250克 霉菌、酵母菌分离培养和计数
22250用于海生细菌的培养和计数incubationmedia22250用于海生细菌的培养和计数
甘露醇钠琼脂 250g 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(ZG药典)