Peprotech Human TGF-beta1-Mammalian
重组细胞因子要求:
1. 真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
2. 纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。
3. 生物活性:进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。
4. 蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
5. 内毒素:kinetic LAL法检测内毒素。
6. 微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤CJ处理。
有不少用户没注意说明书上的描述,而是根据习惯,直接用PBS或培养液(1640或DMEM等)等溶解细胞因子或蛋白的冻干粉。这样做可以吗?
答:有时可以,要看具体情况。PeproTech的大多数细胞因子或蛋白冻干粉的溶解液不是PBS,此时千万不能用PBS或培养液直接来溶解,具体原因在上面已经叙述过。而有部分细胞因子,如重组人KGF(产品编号:100-19)和重组人FGF-23(产品编号:100-52)等,说明书上的溶解液即为1x PBS,此时用PBS溶解完全没问题,那么用培养液溶解也是可以的,不过Z好还是用先用PBS溶解,然后再用培养液稀释。
Peprotech Human TGF-beta1-Mammalian
一定要溶解到指定的浓度。
蛋白在一定的浓度范围内可以保持良好的稳定性,这个范围就是说明书上所标明的浓度范围,该例为0.1-1.0 mg/ml。这个浓度范围对于不同的细胞因子或重组蛋白是不同的。如重组人FGF-6(产品编号:100-30)为0.5-1.0mg/ml,而重组人Activin B(产品编号:120-15)则一定要是0.5mg/ml。
高于或低于该浓度范围会有什么问题呢?
答:首先,细胞因子或蛋白会不稳定,即很容易出现活性下降的现象。其次,高于这个浓度范围,可能会超过该蛋白的Z大溶解浓度,即蛋白无法完全溶解。再者,高于或低于该浓度范围,蛋白可能会出现聚集(aggregation),Z终结果还是部分蛋白未溶解,导致蛋白活性的减弱。一定不能振荡(vortex)。这里所说的振荡是指用涡旋仪进行快速振荡。
有用户会问,若想保证溶解液与冻干粉充分混匀,以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解,该怎么办呢?
答:多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的,一般我们用移液枪的枪头轻吹几下即可。
100-19 | Human KGF |
100-20 | Human VEGF |
100-20A | Human VEGF 121 |
100-21 | Human TGF-beta1-Mammalian |
100-21C | Human TGF-beta1-Produced in CHO |
100-23 | Human FGF-9 |
100-25 | Human FGF-8 |
100-26 | Human FGF-10 |
100-27 | Human FGF-17 |
100-28 | Human FGF-18 |
100-29 | Human FGF-16 |
100-30 | Human FGF-6 |
100-31 | Human FGF-4 |
100-35 | Human TGF-beta2 |
100-39 | Human HGF |
120-02 | Human BMP-2 |
120-03 | Human BMP-7/OP-1 |
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