ORFEXPRESS™-穿梭克隆(ORFEXPRESS™-Shuttle Clones) 产品系列包含经过严格筛选从20,000多个独特的(不重复的)人类全长基因中得到的全长蛋白编码ORF克隆。这个筛选过程包括从多个公用和专有序列数据库中提取基因序列,利用计算机和人工进行比较和确认;去除重复的基因序列;删除和更正错误的序列,以及一些其它的校对步骤。这些全长蛋白编码ORF是用高保真性PCR方法从经过确认的全长cDNA模板中或高质量的人类组织cDNA文库中的获得。这些ORF然后被克隆到改进了的Gateway®Entry载体里。该系统与Invitrogen公司的Gateway®体系完全兼容。
在attL1位点与起始子(ATG)之间 和 attL2位点与终止子(TAG)之间的改进使得ORFEXPRESS™ 穿梭克隆与采用经典方法的克隆载体和技术兼容。
所有的克隆都通过严格的三步质量检测和质量验证:
- 全长DNA序列测序的验证;
- PCR扩增和ORF长度的验证;
- 限制性内切酶的酶切图谱的分析;
ORFEXPRESS™穿梭克隆和Invitrogen公司的 Gateway®克隆技术的兼容性使得ORFs能被简单和快捷地转移到任何Gateway®目的表达载体(pDEST vectors),这些表达载体可用于不同的表达宿主细胞,如E. coli, yeast, baculovirus, 和mammalian cell lines。