特别提示:包括通用型反转录试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:通用型反转录试剂盒
英文名称:Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)
产品货号:QN2089
产品规格:50T|100T
本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应。它采用 M-MLV 进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的 PCR 扩增和分子克隆实验。
本试剂盒中配置的酶为进口的酶。RT 酶采用进口的 M-MLV,所以 cDNA 更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的 RNase YZ剂可有效降低由于外源 RNase 污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于 cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
试剂盒组成 :
组分 | 50T | 100T |
M-MLV(200U/μL) | 50μL | 50μL×2 |
5×M-MLV Buffer | 200μL | 400μL |
Oligo(dT)16(10uM) | 100μL | 200μL |
RNasin(40U/μL) | 25μL | 50μL |
dNTPs(10mM) | 50μL | 100μL |
RNase-free ddH2O | 1mL | 1mL×2 |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃保存,避免反复冻融,有效期1年
操作步骤(反转录反应) :
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分:
1-5μg 总 RNA 或 50-500ng mRNA
2μL Oligo(dT)16或 2 pmole 基因特异性引物
补 RNase-free ddH2O 至 14.5μL
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
4μL 5×M-MLV Buffer
1μL dNTPs
0.5μL RNasin
1μL M-MLV
3、42℃温浴 60min,如果是用随机引物,请先将离心管置 25℃温浴 10min,再 42℃温浴 60min。
4、95℃加热 5min 终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、若用于后续PCR扩增,用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50μL,取2-5μL作为 PCR 反应模板。
注意事项 :
1、用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤CJ处理。
2、试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。
3、RNA 样品要避免反复多次冻融,应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。
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温馨提示:不可用于临床ZL。