一步法高保真RT-PCR MasterMix

特别提示：包括一步法高保真RT-PCR MasterMix在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：一步法高保真RT-PCR MasterMix
英文名称：5×One-Step HiFi RT-PCR Mix
产品货号：MT0019
产品规格：250T|5000T

本品采用稳定GX的一步法RT-PCR预混体系，以RNA为模板，使用基因特异性反向引物进行反转录反应，获得链cDNA，随后使用基因特异性正向引物和反向引物进行PCR扩增，在同一反应体系中一步完成从反转录到PCR的全部过程。扩增产物可直接点样进行电泳检测。5×One-Step HiFi RT-PCR Mix包含了从反转录到PCR的全部试剂组分，包括：耐热M-MLV反转录酶、Rnase Inhibitor、化学修饰的高保真DNA聚合酶、dNTP、绿色Loading染料。其PCR扩增用酶为高保真酶，可轻松扩增2kb以下基因产物，扩增产物除正常电泳检测外，还可连接入平端克隆载体，或直接进行PCR产物测序，确保基因序列的高保真扩增。

特点：
1．55℃进行反转录的MLV反转录酶，能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板。
2．GX便捷的反转录预混体系。
3．高保真扩增。

产品组成：

组分	250T	5000T
5×One-Step HiFi RT-PCR Mix	1ml	20ml

储存：请置于-20℃，可保存3年。

使用方法：

1．按以下组分配制反应液：

加入物	加入量
RNA(病毒DNA/RNA样品直接使用2~10μl）	5-500 ng
5×One-Step HiFi RT-PCR Mix	4μl
基因特异性上游引物（10μM）	0.8μl
基因特异性下游引物（10μM）	0.8μl
RNase-Free H2O	Up to 20μl

注意：过多的RNA 模板量会YZ PCR 反应，通常模板量需要优化。
2．在PCR 仪上按以下条件进行 RT-PCR 反应:

温度	时间	说明
50℃	10分钟	反转录反应
95℃	15分钟	失活MLV，并激活DNA聚合酶
95℃	20s	35~40 循环
Tm值	20s
72℃	2Kb/min
72℃	2分钟	末端延伸

3．PCR反应结束后，直接进行电泳检测。预混液中已经包含绿色染料，无需再加入DNA Loading Buffer。

我公司销售的一步法高保真RT-PCR MasterMix，5×One-Step HiFi RT-PCR Mix质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。