NCI-H719人小细胞肺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏

NCI-H719人小细胞肺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏
ATN-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 840.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代，每周换液2—3次
SNU-251细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。
L-02细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HNEpC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：半贴壁
RKN细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2传代
改良Y培养基，英文名：Modified Y Medium，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离
林格氏液，英文名：Ringer's Solution，用途：用于调节体液、电解质及酸碱平衡
Starky代钠液体培养基，英文名：Starky -Na2S2O3 Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
枯草芽孢杆菌优化培养基，英文名：Bacillus Subtilis Optimization Medium，用途：用于枯草芽孢杆菌优化培养（含麸皮）
细胞形态特性：详见细胞说明书
改良UVM增菌液基础，英文名：UVM Modified Listeria Enrichment Broth Base，用途：用于李氏菌选择性增菌,每225ml添加啶酮酸溶液1支
苏通琼脂培养基基础，英文名：Sauton Agar Medium Base，用途：用于结核杆菌的增菌培养和卡介苗的制备
KAT-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HRCEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LTEP-sm细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人小板膜糖蛋白Ⅱb(GP-Ⅱ)ELISA试剂盒，英文名：Human GP-Ⅱ ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠卵泡抑素(FST)ELISA试剂盒，英文名：Mouse FST ELISA Kit，规格：48T/96T
0.5%葡萄糖肉汤培养基，英文名：0.5% Glucose Broth Medium，用途：用于无菌检查
细胞背景资料：小细胞肺癌；转移；女性
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤(TSPB)基础，英文名：Trypticase Soy Polymyxin Broth Base，用途：用于蜡样芽胞杆菌MPN试验,每100ml添加1支胰酪胨大豆多粘菌素肉汤添加剂
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(赖酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Lysin，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
念珠菌显色培养基，英文名：Candida Chromogenic Medium，用途：用于念珠菌快速检测
Starky代钠液体培养基，英文名：Starky -Na2S2O3 Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
NCI-H1993细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2—1：6传代
RAW 264.7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
UMC-11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TE-4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
2PK-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SZ95细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人ⅩⅣ型胶原(COL14)ELISA试剂盒，英文名：Human COL14 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA试剂盒，英文名：Hcy ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒，英文名：Human gp210 ELISA Kit，规格：48T/96T
化钠结晶紫增菌液，英文名：Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth，用途：用于副溶血性弧菌的选择性增菌
Grein – Meyers 琼脂，英文名：Grein and Meyers Agar(Grein and Meyers, 1958)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
SOB培养基，英文名：SOB Medium，用途：用于大肠杆菌分子遗传学菌株的培养
C4-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Jiyoye细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：每周2-3次。
D283 Med细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮细胞的多细胞聚集体，和一些贴壁细胞；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：每周换液2-3次。
小鼠β-黑色素细胞刺激素(βMSH)ELISA试剂盒，英文名：Mouse βMSH ELISA Kit，规格：48T/96T
人酪酸磺基转移酶1(TPST1)ELISA试剂盒，英文名：Human TPST1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)ELISA试剂盒，英文名：Human ANGPTL6 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)ELISA试剂盒，英文名：Human ZBP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒，英文名：FGF7 ELISA Kit，规格：48T/96T
抗生素培养基G(PH7.0)，英文名：Medium G（PH7.0），用途：用于抗生素检验，每100ml需添加1支甘油
赫氏增菌液，英文名：Hiss Enrichment Broth，用途：用于鼠疫杆菌的培养
RS琼脂，英文名：Rimler-Shotts Agar，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的分离
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基(不含霉素)，英文名：Potato Dextrose Agar Medium（PDA），用途：用于霉菌和酵母菌计数
K氏培养基基础，英文名：K’s Medium Base，用途：用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需使用苹果酸调节pH
MA104细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Loucy细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样　；细胞传代方法：2-3天换液1次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
EFM-192C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDA-MB-175细胞专业复苏；细胞生长特性：松散贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：6传代，每周换液2—3次
普通肉汤，英文名：Routine Broth，用途：含0.1%二钾,用于致病性嗜水气单胞菌的增菌
CHO/dhFr细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Romas细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3T6-Swiss albino细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(Z主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于4℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶：是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T25培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用，如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用15ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶，可以暂时T75培养瓶，加入10-15ml培养基，建议10ml培养基，也可以使用T175培养瓶，加入50-60ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，Z好不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(1000rpm，3min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
3T6-Swiss albino细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。