NCI-H250人小细胞肺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏

NCI-H250人小细胞肺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏
HBL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C8166-CD4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：2-3x10-5细胞/ml
CNE-2Z细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg(约1,000rpm)，5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时Z常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之Z好方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
SK-BR-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
RL细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每周换液2-3次。
细胞生长特性：半贴壁
NCI-H2141细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞传代方法：3-4天换液1次。
石蕊牛乳培养基，英文名：Litmus Milk Medium，用途：用于测定细菌对牛乳的发酵
Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)，英文名：Hugh-Leifson Medium，用途：用于细菌葡萄糖利用试验,确定发酵型或氧化型
尿素琼脂基础(pH7.2)，英文名：Urease Agar Base，用途：用于细菌尿素酶试验,每100ml添加1支40%尿素溶液
胆盐乳糖培养基(BL)，英文名：Bile Lactose Medium，用途：用于铜绿假单胞菌检验
细胞形态特性：详见细胞说明书
APM培养基，英文名：Aeromonas Pyrazinamidase activity Medium，用途：用于吡嗪酰胺酶活性实验,溶解于0.2M Tris-马来酸溶液
营养琼脂(pH6.0)，英文名：Nutrient Agar, pH6.0，用途：用于轻度酸性环境微生物的培养
NCI-H1105细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周换液2-3次
ST细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
SUDHL6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人雌激素受体(ER)ELISA试剂盒，英文名：Human ER ELISA Kit，规格：48T/96T
人半乳凝集素3(GAL3)ELISA试剂盒，英文名：Human GAL3 ELISA Kit，规格：48T/96T
强化梭菌培养基(RCM)，英文名：Reinforced Medium for Clostridia，用途：用于梭菌的增菌培养
细胞背景资料：小细胞肺癌；男性
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明：成纤维细胞：来自胎儿传代50次后衰老死亡，来自成人传代20次后衰老死亡(与具体年龄有关；来自小鼠传代14--28次后衰老死亡，来自乌龟传代90--125次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化，包括：蛋白质合成速度降低，已有蛋白质结构变化，特异蛋白质成份出现;同时，细胞核，线粒体，膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因，尚无定论，出现过好几种理论与假说，其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象，常见的细胞死亡形式有3种：坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中，因为环境因素的突然变化或病原物的入侵，导致一部分细胞死去，称为细胞的病理死亡，或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡；细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于其它两种细胞死亡机理，如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况，一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分；似乎带有“牺牲局部，保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡，明显地受遗传控制，称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡，是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程，无论从形态学、生物学还是生化的特征来说，都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用，在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象，凋亡失控的结果将是可怕的：凋亡不足时，易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病，如老年性痴呆症(Alzheimer"s disease)、帕金森氏症(Parkinson"s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
山梨醇麦康凯半固体培养基，英文名：Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium，用途：用于大肠埃希氏菌O157菌种保存
碱性琼脂，英文名：Alkaline Agar，用途：用于霍乱弧菌的选择性分离
BCYE-Cys琼脂基础，英文名：Buffered Charcoal Yeast Extract Agar without L-cys，用途：用于军团菌选择性分离，每100ml添加1支可溶性焦铁
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)，英文名：Potato dextrose agar，用途：用于霉菌和酵母菌计数
MSCs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFLS-RA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SN12-PM6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Caov-3[Caov3]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
3T6-Swissalbino细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFLS-OA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠天青杀素(AZU)ELISA试剂盒，英文名：Mouse AZU ELISA Kit，规格：48T/96T
人11-β-羟基类固醇脱酶2(HSD11β2)ELISA试剂盒，英文名：Human HSD11β2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人端粒酶逆转录酶(TERT)ELISA试剂盒，英文名：Human TERT ELISA Kit，规格：48T/96T
TTC营养琼脂，英文名：Nutrient Agar with TTC，用途：用于细菌总数测定
M9低盐培养基(5倍浓缩)，英文名：M9 Minimal Salt,5×，用途：用于制备M9低盐培养基,培养重组大肠杆菌菌株
Leeming-Notman培养基基础，英文名：Leeming-Notman Medium，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加1.6ml橄榄油
RENCA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
OC316细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COLO-824细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人膜联蛋白A2(ANXA2)ELISA试剂盒，英文名：Human ANXA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠Ⅲ型胶原(COL3)ELISA试剂盒，英文名：COL3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠信号传导转录激活因子5B(STAT5B)ELISA试剂盒，英文名：STAT5B ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MF/MPF ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠化Tau蛋白(pτ)ELISA试剂盒，英文名：pτ ELISA Kit，规格：48T/96T
肺炎支原体肉汤基础，英文名：Mycoplasma pneumonia Broth Base，用途：含红,用于肺炎支原体培养,需添加小牛血清及YJ剂
葡萄糖琼脂，英文名：Dextrose Agar，用途：用于肠杆菌生化试验
HC琼脂基础，英文名：HC Agar Base，用途：用于中霉菌的计数,每升添加20ml吐温80
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(组酸/亮酸/色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
豆芽汁蔗糖培养基，英文名：Soybean sprout Extract Sucrose Medium，用途：用于真菌尤其是霉菌的培养
LX-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
KYSE-14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
hBMSCs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1092细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WS琼脂，英文名：WS Agar，用途：用于沙门氏菌选择性分离
HS776T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GL261细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H647[H647]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：1)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够高，考虑到这一损失。起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升；2)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物，保存时间为1-5天，但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养；3)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期；4)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Z近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
HHSteC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。