95D人肺巨细胞癌细胞系 能稳定传代多少次
8305C细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:6传代
HIEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RAMSCs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Nb2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JEG细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
传代细胞培养注意事项:1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤:瘤细胞悬液接种1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至10(7)~10(8)/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>10(6)细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种:将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下:1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种1×10(6)腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7-12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3-5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
SV40-MES-13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:心肌成纤维细胞样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
胆盐乳糖培养基(BL),英文名:Bile Lactose Medium,用途:用于铜绿假单胞菌检验
布鲁氏菌培养基基础,英文名:Brucella Medium Base,用途:每100ml添加5%血清以及1支布鲁氏菌选择性添加剂或改良布鲁氏菌选择性添加剂制备血清-葡萄糖-抗生素培养基
艾默生YpSs琼脂/酵母-淀粉琼脂,英文名:Emerson YpSs Agar/ Yeast protein Soluble starch Ag,用途:用于异水霉属及其他霉菌的培养
细胞形态特性:详见细胞说明书
改良MSRV培养基基础(MSRV培养基基础),英文名:Rappaport-Vassiliadis Medium,Semisolid Modificatio,用途:用于沙门氏菌选择性分离,每100ml需添加2mg新生霉素
大鼠补体成分3(C3)ELISA试剂盒,英文名:C3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人分泌跨膜蛋白1(SECTM1)ELISA试剂盒,英文名:Human SECTM1 ELISA Kit,规格:48T/96T
3%化钠三糖铁琼脂,英文名:3% TSI Agar,用途:副溶血性弧菌生化试验
PAC斜面培养基,英文名:PAC Slant Medium,用途:用于弧菌的保存
DOK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GRC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
AN3 CA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:3-1:5传代,2-3天换液1次。
人腺苷高半胱酸水解酶(AHCY)ELISA试剂盒,英文名:Human AHCY ELISA Kit,规格:48T/96T
盐肉汤,英文名:Nitrate Broth,用途:用于盐还原试验
麦氏(Meclary)琼脂,英文名:Meclary Agar,用途:用于真菌培养
高氏合成一号液体培养基,英文名:Gauze’s Synthetic Broth Medium,用途:用于放线菌的培养
橄榄油培养基基础,英文名:olive oil medium for Malassezia,用途:用于马拉色菌的培养,每80ml添加3.2ml橄榄油
细胞背景资料:巨细胞肺癌
NCI-H1781细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人干扰素α21(IFNα21)ELISA试剂盒,英文名:Human IFNα21 ELISA Kit,规格:48T/96T
RAMOS细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:维持细胞浓度在2×105/ml-1×106/ml;根据细胞浓度每2-3天补液1次
BC-019细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
WEHI164细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人富含半胱酸蛋白61(Cyr61)ELISA试剂盒,英文名:Human Cyr61 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠肌原纤蛋白1(FBN1)ELISA试剂盒,英文名:FBN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠谷酰胺酶(GLS)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GLS ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(A-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒,英文名:A-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit,规格:48T/96T
淀粉铵琼脂,英文名:Starch Ammonium Sulphate Agar(Krassilnikov, 1950),用途:用于链霉菌属的培养鉴定
SCCRAM肉汤,英文名:SCCRAM Broth,用途:用于沙门氏菌前增菌
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
KATOⅢ细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HFLS-OA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HTMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MDA-PCA-2B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HOC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L929细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
萨氏培养基(SDAY培养基),英文名:Sabouraud Dextrose Agar with Yeast Extract,用途:用于真菌的分离和培养
玉米粉琼脂,英文名:Corn Meal Agar,用途:用于真菌培养
细胞生长特性:贴壁
缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MR-VP培养基),英文名:MR-VP Medium,用途:用于细菌的MR、VP试验
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
抗生素培养基13号,英文名:Medium 13(Sabouraud LiquidBroth,Modified),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
脱脂乳培养基,英文名:Skim Milk Medium,用途:用于乳酸杆菌的培养
包姜氏琼脂培养基基础,英文名:Bordet-Gengou Agar Medium Base,用途:用于百日咳杆菌的分离,每100ml添加1支甘油、1支青霉素溶液和15ml 无菌脱纤维绵羊全血
YPD肉汤,英文名:YPD Broth,用途:用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
Nitsch&Nitsch培养基,英文名:Nitsch&Nitsch Medium,用途:Nitsch & Nitsch (1969) 含蔗糖不含琼脂
Sf21细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。