Tregs小鼠调节性T细胞系 传代一次需要几天

Tregs小鼠调节性T细胞系 传代一次需要几天
RPMI8226细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VEROC1008(E6)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
Hep G2[HEPG2]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BLB培养基基础，英文名：BLB Medium Base，用途：用于双歧杆菌的分离培养,需添加5-7%无菌无菌脱纤维绵羊全血
改良番茄汁肉汤培养基，英文名：Tomato Juice Broth,Modified，用途：用于乳酸菌的培养和总数测定
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
MS微量元素，英文名：Murashige & Skoog Micronutrients，用途：用于植物组织培养
人角蛋白6C(KRT6C)ELISA试剂盒，英文名：Human KRT6C ELISA Kit，规格：48T/96T
人化P38蛋白激酶(P-P38MAPK)ELISA试剂盒，英文名：Human P-P38MAPK ELISA Kit，规格：48T/96T
人Archease蛋白(ARCH)ELISA试剂盒，英文名：Human ARCH ELISA Kit，规格：48T/96T
无乳固氮螺菌培养基，英文名：Azospirillum Amazonense Medium，用途：用于无乳固氮螺菌的培养
M-绿色酵母菌和霉菌肉汤，英文名：m-Green Yeast and Mold Broth，用途：用于饮料中酵母菌和霉菌的检测
Schaedler琼脂，英文名：Schaedler Agar，用途：用于厌氧菌的分离培养
细胞生长特性：悬浮
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂，英文名：Casein Digest Soybean Agar for Pzase Test，用途：用于吡嗪酰胺酶检测，溶解于Tris-马来酸缓冲液(0.2mol/L,pH6)中
小鼠滑行蛋白α(TXLNa)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TXLNa ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)ELISA试剂盒，英文名：LAMα1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠淀粉样前体蛋白(APP)ELISA试剂盒，英文名：APP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠CD4+分子(CD4+)ELISA试剂盒，英文名：CD4+ ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
大鼠血栓素A2(TX-A2)ELISA试剂盒，英文名：TX-A2 ELISA Kit，规格：48T/96T
HCC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
阿姆斯壮镰刀菌培养基基础，英文名：Armstrong Fusarium Medium Base，用途：用于镰刀菌的培养，每100ml培养基中添加1支阿姆斯壮镰刀菌培养基添加剂
STAA 琼脂基础，英文名：STAA Agar Base，用途：加入不同抗生素制备STA培养基或STAA培养基以用于热杀索斯菌的分离,每升培养基中添加7.5g甘油以及抗生素
HEP 3B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
叠氮钠血琼脂基础，英文名：Azide Blood Agar Base，用途：用于链球菌和葡萄球菌分离和溶血试验,需添加5%绵羊血
Schaedler琼脂，英文名：Schaedler Agar，用途：用于厌氧菌的分离培养
细胞形态特性：详见细胞说明书
VRE琼脂基础，英文名：VRE Agar Base，用途：每升培养基添加1mg美罗培南和6mg万古霉素制成VRE′S
动力培养基，英文名：Power Medium，用途：用于细菌动力试验
293H(HEK-293)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EC97076细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
蛋白胨-盐溶液，英文名：Peptone-Salt Solution，用途：用于样品的稀释
沙门、志贺氏菌增菌培养基，英文名：Salmonella Shigiella Enrichment Broth，用途：用于沙门氏菌、志贺氏菌的选择性增菌
H522细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
CHO-K1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
HPT-8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COS-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
Eugon 肉汤，英文名：Eugon Broth，用途：用于细菌的培养和增菌
Starky代钠琼脂培养基，英文名：Starky -Na2S2O3 Agar Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
EEM培养基，英文名：Enterobacteriaceae Enrichment Mannitol Medium，用途：用于肠道致病菌的增菌
NOK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：调节性T细胞
HEL299细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PZ-HPV-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HMEC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到Z小程度。一般预防可从以下几方面着手：1)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；2)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌CJ要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：75%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒30min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
CL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TCCSUP细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代，2-3天换液1次。
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒，英文名：IL-8/CXCL8 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人脑啡肽酶(NEP)ELISA试剂盒，英文名：Human NEP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠甘丙肽受体4(GALR4)ELISA试剂盒，英文名：GALR4 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg(约1,000rpm)，5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时Z常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之Z好方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
A-172细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
酵母基础，无维生素，英文名：Vitamin Free Yeast Base，用途：用于通过维生素的利用对酵母菌进行分类
KM2猪肺炎支原体肉汤培养基，英文名：KM2 Mycoplasma Hyopneumoniae Broth Medium，用途：江苏二号，需添加马血清、青霉素
SUM52PE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Tca8113细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。