Tregs细胞：小鼠调节性T细胞系 更低代次传代培养

Tregs细胞：小鼠调节性T细胞系 更低代次传代培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
Tregs细胞：小鼠调节性T细胞系 更低代次传代培养
细胞生长特性：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中Z常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
Tregs细胞：小鼠调节性T细胞系 更低代次传代培养
细胞背景资料：调节性T细胞
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；2)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；3)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，37度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
Tregs细胞：小鼠调节性T细胞系 更低代次传代培养
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。

RPC细胞系(大鼠垂体细胞冷藏平台）
L-MTK细胞系(小鼠胸腺激酶缺陷细胞冷藏平台）
CNE-2Z细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
SodiuM sulfate
Dowex? 50WX2
Ethyl 2-Fluoropropionate
5-Chloroindole-2-carboxylic acid Methyl ester
p-MethoxycinnaMic acid, 99%, predoMinantly trans
CHO-K1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台）
C-33A细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台）
HCMEC-D3细胞系(人脑微血管内皮细胞冷藏平台）
TE-11细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
Hs 578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
HCC 94[HCC941122]细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台）
BIC-1细胞系(人食管腺癌细胞冷藏平台）
2,2-dichloro-1-methyl-cyclopropane carboxylic acid
beta-lactamase F. enterobacter cloacae
2-Chloro-6-fluorophenol
n-Docosane
Magnesium acetylacetonate dihydrate
MC3T3-E1细胞系(小鼠胚胎成骨前体细胞冷藏平台）
HCSMC细胞系(人结肠平滑肌细胞冷藏平台）
PAXC-008细胞系(人源癌细胞冷藏平台）
SNU-398细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
TCMK-1细胞系(小鼠肾小管上皮细胞冷藏平台）
MEG-01细胞系(人成巨核白血病细胞冷藏平台）
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
DU145[DU145,DU-145]细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
YD-38细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台）
P3X63Ag8.653细胞系(小鼠瘤细胞冷藏平台）
HCAEC细胞系(人冠状动脉内皮细胞冷藏平台）
2,5-DiMethoxybenzeneboronic acid, 98%
(S)-(+)-2-Pentanol, 97%
(^+)-Propylene oxide, 99+%
2-Acetyl-6-broMopyridine
TRANS-BETA-METHYLSTYRENE
BMSC细胞系(人间充质干细胞冷藏平台）
NCI-H2126[H2126]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
LX2细胞系(人肝星状细胞冷藏平台）
HuTu-80细胞系(人十二脂肠腺癌细胞冷藏平台）
CCC-HEH细胞系(人胚胎心肌组织来源细胞冷藏平台）
786-0细胞系(人肾透明腺癌细胞冷藏平台）
Ethyl 3-(DiMethylaMino)-3-ethoxy-2,2-difluoropropionate
t-Butyl 3-broMobenzoate
Tetrahydrofuran, 99.6%, ACS reagent, stabilized with BHT
Neutral Red
Calcein Blue
OMC-1细胞系(人眼脉络膜黑色素瘤细胞冷藏平台）
VERO C1008细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台）
HBdSMC细胞系(人膀胱平滑肌细胞冷藏平台）
293F细胞系(人胚肾上皮细胞冷藏平台）
CL1-5细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
Ishikawa细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台）
SK-RC-42细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
HT1080(HT-1080)细胞系(人纤维肉瘤细胞冷藏平台）
COLO 320DM细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
MCF7细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
G-402细胞系(人肾平滑肌瘤细胞冷藏平台）
PAMC82细胞系(人胃癌细胞冷藏平台）
Het-1A细胞系(人食管鳞状上皮细胞冷藏平台）
GP5d细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台）
DMS 273细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
TE-8细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
SW1990细胞系(人癌细胞冷藏平台）
5-Ethoxy-4-Methyloxazole
2-Methyl-1-pentene
menadione sodium bisulfite
β-ENK ELISA Kit
ACC-M细胞系(人涎腺癌细胞冷藏平台）
Ramos(RA 1)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
TE-11细胞系(人食管癌细胞冷藏平台）
HePa1-6细胞系(小鼠肝癌细胞冷藏平台）
FM88细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
5-Methylthiazole-2-carboxylic acid
4-Hydroxy-3-nitropyridine N-oxide 97+%
4-Acetamido-3-nitropyridine ,98%
2-Bromo-2'-nitroacetophenone, 98%
BOC-alpha-Methylalanine
NCI-H716[H716]细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台）
WEHI 164细胞系(小鼠纤维肉瘤细胞冷藏平台）
AD293细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
Jurkat D,E细胞系(人T淋巴瘤细胞冷藏平台）
Ca9-22细胞系(人口腔上皮癌细胞冷藏平台）
LMH细胞系(鸡肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H211细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
IGF1 ELISA Kit
Human PSMβ6 ELISA Kit
OPM ELISA Kit
IL24 ELISA Kit
IL-2 ELISA Kit
Human dopamine-β-hydroxylase,DBH ELISA Kit
Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit
3AO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
KS-1细胞系(人胶质母细胞冷藏平台）
HCC4006细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
Mv1Lu细胞系(貂肺上皮细胞冷藏平台）
Hce-8693细胞系(人盲肠腺癌细胞冷藏平台）
AtT20细胞系(小鼠垂体瘤细胞冷藏平台）
Romas细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台）
3T3-Swissalbino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
VX2细胞系(兔间变表皮鳞癌细胞冷藏平台）
NCI-H295R[H295R]细胞系(人肾上腺皮质腺癌细胞冷藏平台）
2-Benzyl phenol
poly(ethylene glycol) monolaurate
3-Phenylglutaric acid
Renin ELISA Kit
WEHI-3B细胞系(小鼠髓样单核白血病细胞冷藏平台）
ROS1728细胞系(大鼠成骨细胞冷藏平台）
MDBK(NBL-1)细胞系(牛肾细胞冷藏平台）
NCI-H460[H460]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2126[H2126]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
Molecular sieves, -8+12 beads (Linde 4A)
Quinoline-7-carboxylic acid
3-Methylbenzotrifluoride 98%
Imidazole, sodium derivative
Cesium dodecahydrododecaborate, min. 98%
HEC-151细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台）
B95-8细胞系(绒猴EBV转化的白细胞冷藏平台）
NOMO-1细胞系(人白血病细胞冷藏平台）
SW 626[SW-626,SW626]细胞系(人卵巢腺癌细胞冷藏平台）
LN229细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台）
ARPE-19细胞系(人视网膜上皮细胞冷藏平台）
HEK293F细胞系(人胚肾细胞冷藏平台）
Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit
Human PLAGL1 ELISA Kit
Monkey ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit
IFN-γ ELISA Kit
Chicken Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
PKCd ELISA Kit
Human PAFAHIB3 (Platelet Activating Factor Acetylhydrolase Ib3) ELISA Kit
Sf-21细胞系(昆虫细胞冷藏平台）
MCF7细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
PMVEC细胞系(大鼠肺微血管内皮细胞冷藏平台）
SPCA-1细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
RPMI 1846细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
ABC-1细胞系(人肺癌腺癌细胞冷藏平台）
Ovary细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
3-Hydroxy-1-adaMantanecarboxylic acid
N,N-DiisopropylethylaMine trihydrofluoride
Hinokitiol
3-AMino-5-broMobenzonitrile
Uridine, 99%
PT-67细胞系(小鼠逆转录病毒包装细胞冷藏平台）
HAC-84细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
MOLM-16细胞系(人白血病细胞冷藏平台）
JF-305细胞系(人癌细胞冷藏平台）
JCA-1细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台）
KYSE150细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
SK-N-SH细胞系(人神经母细胞冷藏平台）
homatropine hydrochloride
hexyl chloroformate
Ethyleneglycol monomethyl ether acrylate
Hexaethyldisiloxane
N-Hydroxysuccinimide
SW 1990细胞系(人癌细胞冷藏平台）
SK-OV-3细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台）
NCI-H2172细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
A498细胞系(人肾癌细胞冷藏平台）
ZR-75-30细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台）
B16-F0细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台）
NT2-D1细胞系(人畸胎瘤细胞冷藏平台）
HEKa细胞系(人体表皮角化细胞冷藏平台）
JHH-2细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
NCI-H838细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2073细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
5-Methoxy-2,4-PyriMidinediol
1-(Phenylsulfonyl)pyrrole, 98%
2,6-Dichloro-4-hydroxybenzaldehyde, 98%
M-Phenylene diaMine hydrochloride
Geranyl Acetone
M453细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台）
NMC-G1细胞系(人脑胶质细胞冷藏平台）
RK-13细胞系(兔肾细胞冷藏平台）
DMS114细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
L1210细胞系(小鼠白血病细胞冷藏平台）
NCI-H1436细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
4-((PhenylaMino)Methyl)phenylboronic acid
3-Biphenylcarboxylic acid, 97%
1-Methyl-1H-indole-5-carbaldehyde, 97%
1-DODECANESULFONIC ACID SODIUM SALT
3'-AMinoacetophenone
GES细胞系(人肾上皮细胞冷藏平台）
HONE-1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
VX2细胞系(兔间变表皮鳞癌细胞冷藏平台）
SW-13细胞系(人肾上腺皮质癌细胞冷藏平台）
GA-10(Clone4)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台）
SW1573细胞系(人肺泡细胞冷藏平台）
NCI-H1568细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
S180-V细胞系(小鼠腹水瘤细胞冷藏平台）
NCI-H2009[H2009]细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2198[H2198]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
KYSE70细胞系(人食管鳞癌细胞冷藏平台）
NH-6细胞系(人肾上腺神经母细胞冷藏平台）
LCLC-103H细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HME4细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台）
RPMI 8226细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台）
J774A1细胞系(小鼠单核巨噬细胞冷藏平台）
HCT116细胞系(人结直肠癌细胞冷藏平台）
3-(2-naphthyl)-l-alanine hydrochloride
(Octadecadienoic acid) dipolymer
Sodium propyl p-hydroxybenzoate
Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit
SF9细胞系(昆虫卵巢细胞冷藏平台）
C3H10T1 2 Clone 8细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台）
GRSL细胞系(小鼠胸腺性白血病细胞冷藏平台）
T/GHA-VSMC细胞系(人血管平滑肌细胞冷藏平台）
HCC70细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台）
(4-Phenoxyphenyl)methanol , 97%
1H,1H-Perfluorotetradecan-1-ol 96%
4-Aminophenol
4-Iodophenoxyacetic Acid
CYCLOHEXENE SULFIDE
SVOG细胞系(人卵巢颗粒细胞冷藏平台）
OKa-C-1细胞系(人低分化肺癌鳞癌细胞冷藏平台）
NS2OY细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台）
HNE1细胞系(人鼻咽癌细胞冷藏平台）
NCI-H1417细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
SMMC-7721细胞系(人肝癌细胞冷藏平台）
PC-3M-2B4细胞系(人前列腺癌低转移细胞冷藏平台）
Mouse Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
TGFβ2 ELISA Kit
Human High density lipoprotein,HDL ELISA Kit
TTR ELISA Kit
20SP ELISA Kit
GC ELISA Kit
PNMT ELISA Kit
Human LAM ELISA Kit
LTEP sm细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
GLC-82细胞系(人肺腺癌细胞冷藏平台）
NCI-H2029细胞系(人肺癌细胞冷藏平台）
HRA-19细胞系(人结肠癌腺癌细胞冷藏平台）