Tregs小鼠调节性T细胞系 培养几天能传代一次

Tregs小鼠调节性T细胞系 培养几天能传代一次
人高尔基体蛋白A6(GOLGA6)ELISA试剂盒，英文名：Human GOLGA6 ELISA Kit，规格：48T/96T
人UL16结合蛋白2(ULBP2)ELISA试剂盒，英文名：Human ULBP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
NS20Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 934.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代，
1%葡萄糖肉汤培养基，英文名：1% Dextrose Broth Medium，用途：用于初次分离细菌的增菌培养
改良高氏合成一号液体培养基，英文名：Gauze’s Synthetic Broth Medium,Modified，用途：用于放线菌的培养
橄榄油培养基基础，英文名：olive oil medium for Malassezia，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加3.2ml橄榄油
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人钩端螺旋体IgM(Lebtospira lgM)ELISA试剂盒，英文名：Human Lebtospira lgM ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠核受体相互作用蛋白1(NRIP1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse NRIP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人甾醇-O-酰基转移酶1(SOAT1)ELISA试剂盒，英文名：Human SOAT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
NT培养基，英文名：NT Medium，用途：含激素（6-BA、NAA），不含琼脂，用于原生质体的培养
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点：(1)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：0.25%胰蛋白酶，含10%～20%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒)，2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×106～1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
马铃薯琼脂，英文名：Potato Agar，用途：不含葡萄糖，用于霉菌的分离培养
Miapaca2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
IPEC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞形态特性：详见细胞说明书
HumanARO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
TSCC1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
胰酪大豆胨液体培养基/大豆酪蛋白肉汤培养基，英文名：Fluid Soybean-Casein Digest Broth，用途：用于无菌检查、细菌培养及YJ剂效力检查
6.5%化钠葡萄糖琼脂，英文名：6.5%Sodium Dextrose Agar，用途：用于肠球菌确证和培养
MGC80-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
产毒培养基，英文名：Toxin-Producing Medium，用途：用于青霉和曲霉的产毒培养
改良GAM琼脂基础，英文名：Glfu Anaerobic Medium Agar Base,Modified，用途：用于厌氧菌的培养,每100ml添加化血红素溶液、维生素K1溶液各1支
Eugon 琼脂，英文名：Eugon Agar，用途：用于细菌的培养
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
大鼠衍生因子/FAM3B抗体(PANDER)ELISA试剂盒，英文名：PANDER ELISA Kit，规格：48T/96T
人Dystonin蛋白(DST)ELISA试剂盒，英文名：Human DST ELISA Kit，规格：48T/96T
TGW细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：神经元细胞；细胞传代方法：1：2传代
PHM82细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HepaRG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Trans-Vag肉汤基础，英文名：Trans-Vag Broth Base，用途：用于链球菌的选择性分离，每100ml添加庆大霉素溶液、啶酮酸溶液各1支
葡萄球菌增菌肉汤基础，英文名：Staphylococcus Enrichment Broth Base，用途：用于凝固酶阳性葡萄球菌选择性增菌,每100ml添加1支1%亚碲酸钾溶液
BV173细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HLMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLC/PRF/5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
Eugon 琼脂，英文名：Eugon Agar，用途：用于细菌的培养
伊红美蓝琼脂(EMB)，英文名：Levine Eosin-Methylene Blue-Agar Medium，用途：用于肠道菌选择性分离
改良NBB肉汤基础，英文名：NBB Broth Base,Modified，用途：用于啤酒中微生物的检测
细胞背景资料：调节性T细胞
VLcop细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
淀粉铵盐培养基，英文名：Starch Ammonium Salt Medium，用途：用于放线菌的分离和计数
假单胞菌琼脂培养基基础/CN琼脂基础，英文名：CN Agar Base，用途：用于绿脓杆菌滤膜法测定,每100ml添加甘油、啶酮酸溶液各1支
T-CEM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：悬浮
C3H/10T1/2,Clone 8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDA-MB-468细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2-1：4传代；2-3天换液1次
抗生素培养基C(PH8.0)，英文名：Medium C（PH8.0），用途：用于抗生素检测
毛藓菌琼脂2号，英文名：Trichophyton Agar #2，用途：用于毛藓菌属的鉴定
含糖牛肉汤琼脂培养基(含碳酸)，英文名：Beef soup Agar Medium with Lactose and Calcium car，用途：用于乳酸菌计数
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠蛋白酪酸酶(PTP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PTP ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠白介素22(IL22)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IL22 ELISA Kit，规格：48T/96T
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素CJ；血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
NCI-H1876细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2次。
GLC-82细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CT-26.WT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。