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  • 荧光波长Z长（红色）—Rhod 2-AM 同仁Dojindo R002 现货

    荧光波长Z长（红色）—Rhod 2-AM 同仁Dojindo R002 现货

    产品信息

    保存条件： 已收到实际货物为准 供应商： 已收到实际货物为准 保质期： 已收到实际货物为准 数量： 99

  • 在所有的钙离子指示剂中，Rhod 2荧光信号的波长Z长。它具有和罗丹明类似的激发和发射波长，分别为557 nm和581 nm。这样的激发波长使得我们很容易就能找到氩和氪光源的激光。尽管有人认为Rhod 2的荧光信号仅仅将钙复合物的荧光增加了数倍，但是Dojindo的Rhod 2由于具有很高的纯度，能有效地将钙荧光信号增加80-100倍左右，使得它的信号强度在所有的钙离子探针里面是的。所以，我们强烈建议使用Rhod 2作为探针用激光显微镜来检测细胞内的钙离子情况。有报道称，特别是在神经组织切片培养方面，Rhod 2具有定位点的轮廓线更加清晰的特点。Rhod 2和钙离子的解离常数为（Kd＝ 1.0 mM ），在所有的钙离子荧光探针中是的，为监测钙离子浓度提供了一个广阔的范围。Rhod 2-AM是一种Rhod 2的乙酰甲酯衍生物，能非常容易的通过AM法负载到细胞内。操作说明(for Human T cells)*
    试剂: 
    2 mM的Rhod 2-AM/DMSO (将1 mg Rhod 2-AM溶于442 µl DMSO) 
    Pluronic F127
    Hanks' balanced salt solution (HBSS) 
    HEPES buffer saline (    10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mMglucose, 0.1% BSA, pH 7.4)
     
    操作: 
    1.     向Rhod 2-AM/DMSO溶液中加入16.5 mg Pluronic F127，Pluronic F127可以防止Rhod 2-AM在HBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
    2. 用HBSS稀释Rhod 2-AM溶液，制备4 µM的Rhod 2-AM working solution。
    3. 将Rhod 2-AM working solution加入细胞，在    37 ℃培养20分钟。
    4. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40分钟。
    5. 用HEPES buffer saline洗涤细胞3次，然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮，制成1x105 cells/ml的溶液。
    6.     37 ℃下培养10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。 
    温馨提示：不可用于临床ZL。

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