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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括YT392型M-MuLV反转录酶(逆转录酶)北京厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:YT392型M-MuLV反转录酶(逆转录酶)北京厂家
编号:YT392
规格:2000U
英文名:M-MuLV Reverse Transcriptase
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本品是一种经过改造和优化的M-MuLV反转录酶(RNase H-)。和普通的M-MuLV反转录酶相比,M-MuLV反转录酶(RNase H-)也是一种依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶,可以以RNA或DNA为模板在引物存在的情况下完成互补DNA链的合成;但缺失了Ribonuclease H(RNase H)酶活性,不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA。M-MuLV反转录酶(RNase H-)是Z常用的反转录酶之一。
特点:M-MuLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达13kb的cDNA,而普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)仅能合成长达9kb的cDNA;M-MuLV反转录酶(RNase H-)的Z适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性,可以避免普通的M-MuLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。
用途:M-MuLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA条链的合成。M-MuLV反转录酶(RNase H-)合成的cDNA条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。M-MuLV反转录酶(RNase H-)也可以用于DNA探针的标记,通过引物延伸(primer extention)来分析RNA,以及用于基因芯片荧光探针的标记。
来源:本M-MuLV反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达,表达的基因为经过突变优化的编码Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase的pol基因片段。
活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTMP into a polynucleotide fraction in 10 min at 37℃. Enzyme activity is assayed in 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 6 mM MgCl2, 10 mM DTT, 40 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP, 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA条链等的需要。
酶储存溶液:50 mM Tris, pH 8.3, 100mM NaCl, 1 mM EDTA, 5 mM DTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。
Reaction Buffer(5X):250 mM Tris, pH 8.3 at 25℃, 250 mM KCl, 20 mM MgCl2, 50 mM DTT。
失活或YZ:70℃孵育10分钟可以导致M-MuLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚*(polyamine)对M-MuLV反转录酶(RNase H-)有YZ作用。
本产品中M-MuLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。
储存条件:-20℃。
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·Western及IP细胞裂解液
编号:YT038
英文名称:Cell lysis buffer for Western and IP
规格:100ml
本品是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种YZ剂。可以有效YZ蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036,YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·p38 MAPK抗体
编号:YT820
英文名称:anti-p38 MAPK antibody
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的p38 MAPK蛋白为抗原制备而成的抗p38 MAPK小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本p38 MAPK抗体可以检测内源性的total p38 MAPK,不识别p44/42 MAPK,也不识别SAPK/JNK。
本抗体常用于检测磷酸化p38 MAPK时的对照,用于确定p38 MAPK磷酸化水平发生变化,但总的p38MAPK蛋白水平没有变化。
p38 MAP kinase(MAPK)也称RK或CSBP,是酵母中HOG kinase在哺乳动物中的同源蛋白,在细胞因子和应激(stress)诱导的信号转导过程中起重要作用。p38 MAPK可以被炎性细胞因子、LPS、紫外线、生长因子以及一些stress所激活。MKK3和SEK可以通过磷酸化p38 MAPK的Thr180和Tyr182,从而激活p38 MAPK。激活的p38 MAPK可以磷酸化激活MAPKAP kinase等,并激活ATF-2、Max和MEF2等转录因子。上述*基酸残基的位置为相对应于human p38 MAP kinase的*基酸位置。
产品组份:
p38 MAPK抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原:经过适当修饰的p38 MAPK蛋白
克隆性:单克隆
宿主:小鼠
用途:WB,IP,IF,FCM
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
同种型:IgG1
p38 MAPK分子量:43kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:50),IF(1:50),FCM(1:50)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·p38 MAPKYZ剂(SB203580)
编号:YT348
英文名称:p38 MAP Kinase Inhibitor
规格:1mg
本品是一种常用的p38 MAPKYZ剂。SB203580可以通透细胞,YZp38 MAP kinase,YZ后续MAPKAP Kinase-2和MAPKAP Kinase-3的激活。通过YZp38 MAPK,SB203580可以有效YZ一些炎症因子(如IL-1β、TNF-α)诱导的部分信号转导。SB203580选择性YZp38 MAPK,IC50为600 nM;对于JNK/SAPK和p44/42 MAPK(即Erk1/2)无显著的YZ作用,IC50仅为100 μM。本品用DMSO配制,浓度为20mg/ml,共50μl。
CAS:152121-47-6
分子式:C21H16N3FOS
分子量:377.43
纯度:>99%。
注意事项:
1. 本产品对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
2. 本SB203580在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
储存条件:-20℃避光,有效期12个月。
·总超氧化物歧化酶活性检测试剂盒(NBT法)
编号:YT311
英文名称:Total Superoxide Dismutase Assay Kit with NBT
规格:100次
本试剂盒是一种基于NBT的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化*(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
本试剂盒采用经典的氮蓝四唑(NBT)显色法。通过黄嘌呤(Xanthine)及黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase)反应系统产生超氧阴离子(O2-.),将氮蓝四唑还原为蓝色的甲臜(formazan),后者在560nm处有强吸收。而SOD可清除超氧阴离子,从而YZ了甲臜的形成。反应液蓝色愈深,说明超氧化物岐化酶活性愈低,反之则酶活性愈高。据此通过比色分析就可以计算出超氧化物岐化酶活性水平。本试剂盒的检测原理图如下:
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基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和NBT的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化*的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化*,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化*酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化*的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化*时,对于检测结果仍无显著影响。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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温馨提示:不可用于临床ZL。