北京YT394型M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)优惠促销

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北京百奥莱博专业生产销售北京YT394型M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京YT394型M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)优惠促销
产地：国产|进口
英文名：M-MLV reverse transcriptase II (RNase H-)
编号：YT394
规格：2000U|10KU|50KU
品Pai：百奥莱博
本品是一种经过改造和优化的M-MLV反转录酶，具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性，能够以RNA或DNA为模板，在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成，即可以进行cDNA(complementary DNA)的DY链合成。

本产品是最常用的反转录酶之一，广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNADY条链的合成，后续可以用于PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。本品还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、地高*(代"辛")或同位素标记等，也可以通过引物延伸(primer extention)来分析和研究RNA。

本产品无RNase H活性，反转录效率高、产物长度长。本产品与野生型M-MLV反转录酶相比，无RNase H活性，不能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA，从而有助于GX合成长度更长的cDNA。本产品经测试可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1)，反转录的ZD长度可以超过10kb。


使用本品反转录总RNA后，对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常GX地被反转录。

本产品热稳定性高。最适反应温度为42-45℃，但当温度达到50℃时仍具有很高活性，且可获得较高产量的cDNA。


在不同温度下的反转录效果。用从NIH3T3细胞抽提获得的总RNA 500 ng，在20μl的反转录体系中按照图中所示温度进行反转录。反转录完成后取1μl反转录产品进行目的基因的PCR扩增和电泳。

本品是一种大肠杆菌重组高表达的的反转录酶，由于其表达量非常高，大大提高了本产品的性价比。本反转录酶含有从Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因，并进行了突变优化以提高其热稳定性、反转录效率和表达量。

酶活性定义：One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反应体系为 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNADY条链等的需要。

酶储存溶液：20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。

失活或YZ：80℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对M-MLV反转录酶(RNase H-)有YZ作用。

本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl，用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。

储存条件：-20℃。

北京YT394型M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)优惠促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·非变性非还原性蛋白上样缓冲液(5X)
编号：YT054
英文名称：Native Gel Sample Loading Buffer，5X
规格：2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液，本产品中不含SDS等变性试剂，也不含DTT、巯基乙醇等还原性试剂，可以用于常规的非变性非还原性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·硫酸卡那霉素(细菌培养用)
编号：YT431
英文名称：Kanamycin sulfate
规格：1g
本品是细菌培养常用抗生素，用于配制含卡那霉素的LB或LB平板等。推荐工作浓度为10-50mg/L。也可以用于培养细胞的杀菌。对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有杀灭或YZ作用。用于真核细胞培养时，推荐工作浓度为100mg/L。可以配制成10-50mg/ml的储备液。储备液4℃稳定，-20℃可以长期保存。

CAS：25389-94-0
分子式：C18H36N4O11·H2SO4
分子量：582.58

储存条件：室温。

·磷酸化ATM(Ser1981位点)抗体
编号：YT641
英文名称：anti-Phospho-ATM(Ser1981) antibody
规格：>20次
本抗体是用人工合成的人ATM 1974-1988位一段多肽(SLAFEEG[pS]QSTTISS)作为抗原制备而成的抗Phospho-ATM(Ser1981)小鼠单克隆抗体。该抗体用protein G和抗原亲和柱经过两步纯化得到。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Phospho-ATM(Ser1981)抗体可以识别人、小鼠和大鼠的Phospho-ATM(Ser1981)，其他种属未经测试。未发现和其它ATM家族蛋白或1981位没有磷酸化的ATM有交叉反应。

ATM即Ataxia telagiectasia mutated kinase，和ataxia telangiectasia and Rad3-related kinase(ATR)是相关联的激酶，都在调节细胞周期的checkpoint和DNA修复过程中起重要作用。ATM可以磷酸化p53, p95/NBS1, MDM2, Chk2, BRCA1, CtIP,4E-BP1, Chk1, Chk2, RAD17和RAD9等。辐射导致的DNA损伤可以导致ATM Ser1981位的磷酸化和ATM激活。ATM突变会导致autosomal recessive disease taxia telagiectasia (共济失调-毛细血管扩张症)。

组份：
Phospho-ATM(Ser1981)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

交叉反应性：人，小鼠，大鼠
宿主：小鼠
免疫原物种：人
免疫原：ATM 1974-1988位一段多肽(SLAFEEG[pS]QSTTISS)
同种型：IgG1κ
ATM分子量：370kD
克隆性：单克隆抗体
应用：WB,IP,IC, IF
推荐稀释比例：WB（1:1000）, IP（1:100）, IC（1:500）, IF（1:500）

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·DNA聚合酶(高保真)(GX率)(双平端克隆)
编号：YT374
英文名称：Efficient & HiFi DNA Polymerase
规格：200U|1000U
本品是一种超高性能DNA聚合酶，它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。

本品扩增速度极快，扩增小于6kb的DNA*(代"片")段时，延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。由于其超快的扩增速度，可以显著缩短PCR扩增所需的时间。

本品是一种高保真DNA聚合酶，不仅可以非常GX地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应，它同时还具有3’至5’的外切酶活性，它的错误发生概率比Taq酶要低52倍，比pfu酶要约低6倍。

本品扩增长度长，可以达到12kb。非常适合长片段DNA的扩增，扩增出来的片段可以轻松达到12kb，更长片段的扩增效果未经测试。本品可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA*(代"片")段的准确扩增，因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。

以λDNA为模板，PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图如下



用途：高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。扩增出来的DNA*(代"片")断为双平端，可以直接用于双平端克隆。

来源：通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃
.
纯度：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶，不含RNA酶，满足常规PCR反应要求。

酶储存溶液：20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。

失活或YZ：酚氯*(代"仿")抽提可以使本酶失活。

注意事项：PCR反应非常灵敏，在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照。


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·罗丹明123
编号：YT149
英文名称：Rhodamine 123
规格：5mg
本品是一种可以通透细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，广泛用作检测线粒体膜电位的荧光探针，也常用于细胞凋亡检测。

Rhodamine 123可以快速通过细胞膜，仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获，并且对细胞没有任何毒性。Rhodamine 123的ZD激发波长为507nm，ZD发射波长为529nm。在荧光显微镜下观察，呈现黄绿色荧光。Rhodamine 123为红棕色粉末，溶于DMSO，也溶于乙醇，在乙醇中的溶解度可达20mg/ml。

CAS：62669-70-9
分子式：C21H17ClN2O3
分子量：380.82
纯度：＞95%

储存条件：室温，有效期2年。

·T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
编号：YT513
英文名称：T4 Polynucleotide Kinase
规格：100U|500U
本酶是一种多聚核苷酸5"羟基激酶，可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应：5"-OH + NTP → 5"-P + NDP。

上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下，T4 Polynucleotide Kinase可以显示出5"磷酸酯酶的活性，催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产生相同的反应：5"-P + NDP → 5"-OH + NTP(最适pH为6.4左右)。

当ATP和ADP都适量存在时，T4 Polynucleotide Kinase可以催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团和ATP的γ位磷酸基团之间的交换反应。其他NTP也可产生相同的反应：5"-P + NTP + NDP→5"-P + NDP + NTP。T4 Polynucleotide Kinase同时具有3"磷酸酯酶活性，可催化3"磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化：3"-P → 3"-OH + Pi(最适pH为5.9左右)。T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近，而磷酸酯酶活性在N-末端附近。

产品组份：
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl) ——————100U
Reaction Buffer A(10X)————————————80μl
Reaction Buffer B(10X)————————————40μl
24% PEG Solution———————————————40μl

用途：寡核苷酸、DNA或RNA的5"末端标记，用作Southern、Northern、EMSA等的探针，凝胶电泳的marker，DNA测序引物，PCR引物等；使寡核苷酸、DNA或RNA的5"端磷酸化，确保后续连接反应顺利进行；催化3"磷酸化的单核苷酸的5"磷酸化，使该单核苷酸可以和DNA或RNA的3"末端连接；去除3"端磷酸基团。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：37℃30分钟内，将转移ATP上1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5"-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：100mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgCl2，5mM DTT，0.5mM 5"-OH DNA，0.05mM ATP，0.1MBq/ml [γ-33P]-ATP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：20mM Tris-HCl(pH7.5)，25mM KCl，0.1mM EDTA，2mM DTT，50% glycerol。
Reaction Buffer A(10X)(用于磷酸化反应)：500mM Tris-HCl(pH7.6 at 25℃)，100mM MgCl2，50mM DTT，1mM spermidine，1mM EDTA。
Reaction Buffer B(10X)(用于交换反应)：500mM imidazole-HCl(pH6.4 at 25℃)，0.18M MgCl2，50mM DTT，1mM spermidine，1mM EDTA，1mM ADP。
失活或YZ：75℃加热10分钟可使T4 Polynucleotide Kinase失活，加入EDTA也可使T4 Polynucleotide Kinase失活。金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著YZT4 Polynucleotide Kinase的活性。
储存条件：-20℃。

注意事项：
1. 铵盐沉淀获得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。铵盐可强烈YZT4 Polynucleotide Kinase的酶活性。
2. PEG可促进磷酸化反应速率和效率；交换反应体系应加入PEG。

使用说明：
1. DNA 5" 末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA—————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)———————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)————20pmol
补充无核酸酶的去离子水 ———————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)——————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在ZD速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代"仿")抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

2. DNA 5’ 末端磷酸化：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)——————————2µl
0.1mM ATP—————————————————1µl
补充无核酸酶的去离子水 ——————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)—————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在ZD速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代"仿")抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

3. 通过交换反应(exchange reaction)进行DNA 5" 末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待磷酸化DNA——————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer B (10X)————————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)—————40pmol
24% PEG Solution ———————————————4µl
补充无核酸酶的去离子水 ————————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)———————1µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在ZD速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀，以终止反应。
e. 后续可以使用酚氯*(代"仿")抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。

4. 其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。

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