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百奥莱博专业生产销*(代"售")即用型蓝白T载体C型(T7-T3,无MCS)价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:即用型蓝白T载体C型(T7-T3,无MCS)价格
编号:BTN120513
规格:20次
英文名:Instant Blue-White Vector T,Type C
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5´都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
产品特点:
1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3. 无Nde I和Nco I等多克隆位点,便于重组基因的克隆
4. 来源于pBlueSoript Ⅱsk(+),故克隆位点两侧分别有T7和T3 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1复制起始子,可以制备单链DNA。
产品组成:
组分 | 规格 |
即用型蓝白T载体C型(10ng/μL) | 60μl |
阳性对照(35ng/μl) | 30μl |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
质粒图谱
关于
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BTN100835 胃蛋白酶YZ剂溶液(1mg/mL) Pepstatin Solution
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SY0390 牛纤维蛋白原 Bovine Fibrinogen
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YT320 蛋白转运YZ剂(Brefeldin A) Brefeldin A
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ALH378 PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色) PAGE protein staining kit
SV0864 多重 PCR 5X Master Mix
WE0307 低背景ECL化学发光检测试剂盒 cwECL Western Blot Kit
BTN131204 动态浊度法内毒素定量试剂盒 Eendotoxin Quantification Kit(Dynamic turbidity method)
SV1336 Poly(U) 聚合酶
RFT174 *苄青霉素溶液(100mg/ml) Ampicillin solution
KFS252 Hoechst 33258染色液(即用型)
SY0491 碘化丙啶染液(1mg/ml) Propidium Iodide Staining Solution(1mg/ml)
SV0472 MluCI限制性内切酶 MluCI Restriction Endonuclease
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YT215 生物素标记β-Catenin/TCF凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled β-Catenin/TCF Probe For EMSA
BTN160686-2 SuperTOPO-Amp TA克隆试剂盒 SuperTOPO TA Cloning Kit
ALH042 骨RNA提取试剂盒 Bone tissue RNA Extraction Kit
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·萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒
编号:BTN130597
英文名称:Firefly Luciferase Assay Kit
规格:100次
本试剂盒采用通用裂解缓冲液,能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感,所以生物发光法是报告基因检测Z常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化,发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应,具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围),酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下:
试剂盒特点:1.高度灵敏:可检测10⁻¹⁸~10⁻²ºmol荧光素酶。
2.线性范围宽:线性范围达到7~8个数量级。
3.快速简便:特别适合于高通量筛选。
4.兼容性好:与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5.本产品可足够100次荧光素酶检测。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液) | 20mL |
Fassay Buffer | 10mL |
Fassay Substrate(底物) | 0.5mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃或-80℃避光保存,有效期半年。
使用方法:★
裂解细胞:1. 配制裂解液:临用前,取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB),用双蒸水稀释至1×ULB,混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞:倾去培养板/皿中的培养液,加入足量PBS ,轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞:按照下表中推荐的体积,在孔/皿中加入1×ULB ,混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟;培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞,将细胞悬液移入1.5mL离心管,在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定,也可离心30秒,取上清液做发光测定。
表:不同孔/皿所需1×ULB体积 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 | 35mm平皿 | 60mm平皿 |
50μL | 80μL | 150μL | 250μL | 500μL | 500μL | 1000μL |
★
配制发光反应液:测定前,室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate,混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate,配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★
测定仪器的设置:按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器,将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器,一般将测定延迟设为2秒,将测读时间设为10~20秒,Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★
手动发光测定:取待测样品20μl加入测量管底部,取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部,轻轻敲击管壁3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品,则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部,用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL,轻轻敲击板侧3~5次混匀,放入仪器中立即测定,记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★
自动发光测定:配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部,启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
注意事项:1.Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放,避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔,可分装成合适体积分次使用。
2.1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定,应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3.用多孔板同时手动测定多个样品时,要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4.本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用,可进行一体化的双荧光素酶检测。
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温馨提示:不可用于临床ZL。