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百奥莱博专业生产销*(代"售")非酶DNA清除剂-2(<200nt) RNA纯化,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:非酶DNA清除剂-2(<200nt) RNA纯化
编号:BTN70801
规格:15次
产地:国产|进口
英文名:Non-enzymatic DNA Scavenger
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前Z常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。百奥莱博开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
产品特点:
1.GX,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。
2. 本身不含RNase污染,因为本产品为非酶产品;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。
3.快速,只需要十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 能用于小RNA中DNA污染的去除。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合(即100μl RNA溶液需加100μL DNA Scavenger-2),充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足100μL,Z好加无RNase水补足到100μL以便后续操作,如果体积大于100μL,试剂的用量也需要按比例增加。
2. 加入相当于RNA溶液和DNA Scavenger-2 混合液总体积1/2的自备*仿,充分震荡半分钟。
3. 12000~15000g室温或4℃离心1-3分钟。
4.转移上清到一个RNase-free的塑料离心管中,加2倍体积的溶液B(用前摇匀),充分震荡半分钟。
5. 12000~15000g室温或4℃离心10分钟后,小心弃上清。如果处理的样品中含有小RNA,Z好使用30分钟的离心时间。
6. 加1mL自备75%乙醇,充分震荡半分钟。
7. 12000~15000g室温或4℃离心5分钟后小心弃上清。
8. 短暂快速离心,小心吸弃余液。
9. 加入自备RNase-free 水溶解RNA沉淀后立即使用或放-80℃长期保存。
疑难解答:
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
Q:为何处理后的RNA还有DNA 条带?
A:有些时候(尤其是使用非变性电泳检测时)RNA 会形成聚合物,电泳很慢,人们会误以为是DNA,可以加少量无DNase的RNase处理样品,确认就是DNA。如果是,可能是样品中盐浓度过高使DNA 去除效率降低,可以预先用乙醇沉淀法去掉盐离子。
Q:本产品跟DNA Scavenger(BTN60201)有何区别?
A:前者可以用于小RNA(长度小于200nt)的RNA样品而后者不能。
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9001-32-5 Fibrinogen 纤维蛋白原 (牛源)
百里酚蓝-酚酞指示剂 100ml
ARB12946 小鼠血纤蛋白原(Fbg)含量分析 Mouse fibrinogen,fbg ELISA KIT
9014-01-1 蛋白酶(枯草杆菌) Proteinase(Bacillus subtilis)
DNA Marker(250~15000bp)
盐*(代"酸")吡哆醛 MTX 65-22-5
ARB13036 小鼠卵巢癌标志物CA125Elisa方法检测 Mouse ovarian cancer marker-ca125 ELISA KIT
F030416 胶体金标记兔抗人IgM抗体 Rabbit Anti-Human IgM*GOLD
原花青素 Fmoc-Asn(Trt)-OH 4852-22-6
甲砜霉素 BOC-D-Proline 15318-45-3
丙二酰胺 3-NPA 108-13-4
DP107 高纯度质粒小提中量试剂盒
柠檬酸* 1,3,5-Tribromobenzene 6100-05-6
非酶DNA清除剂-2(<200nt) RNA纯化关键词:<200nt,非酶DNA清除剂-2(<200nt),BTN70801,Non-enzymatic DNA Scavenger
ARB11347 人类白细胞抗原B27(HLA-B27)酶免分析 Human leucocyte antigen b27,hla-b27 ELISA KIT
PY01-171 酚酞 ind 25克
N,N"-二琥珀酰亚胺基碳酸酯 Penicillin V potassiu*(代"m") salt 74124-79-1
86-87-3 Naphthalene acetic acid(NAA) α-*乙酸
BL1431 1×TBST
NF-221 抗人HBsAg血清
BTN80812 考马斯亮蓝染液 Coomassie Blue G-250 Stain Solution
ARB11813 人膜攻击复合物(MAC)含量测试 Human membrane attack complex,mac ELISA KIT
BOC-L-异亮*酸 Amberlite 732 13139-16-7
ARB12941 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA代测服务 Mouse platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
BL1366 总RNA提取试剂 Trlquick Resgent
甲基磺酸乙酯 Magnesium trisilicate 62-50-0
Luxol Fast Blue染色液 50ml
PY02-334 糖类发酵培养基 250克
ARB12732 小鼠6酮前列腺素F1A(6-keto-PGF1A)酶免分析 Mouse 6-keto-prostaglandin f1a,6-k-pgf1a ELISA KIT
pGM-Simple-T Fast连接试剂盒
BTN90308 亲和硅烷 Binding Silane
BL0959 胶体金标记兔抗猪IgG抗体
非酶DNA清除剂-2(<200nt) RNA纯化关键词:<200nt,非酶DNA清除剂-2(<200nt),BTN70801,Non-enzymatic DNA Scavenger
·凝胶法内毒素半定量试剂盒
编号:BTN130504
英文名称:Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
规格:10×0.1mL
本试剂盒又称鲎试剂,为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
鲎试剂,灵敏度0.06 EU/mL | 0.1ml×10支 |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,阴凉处避光保存,有效期两年。
使用方法:一、样品溶液的制备样品的pH值应在6.0–8.0 之间,若超出此范围,需用无热原缓冲液或0.1N*氧化*、0.1N 盐*(代"酸")调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质,见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β-D-葡聚糖,需选用不会对(1,3)β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。
二:细菌内毒素标准溶液及对照液的准备2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
取细菌内毒素工作标准品1支,按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ,1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
注:鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
2.2 阴性对照液:即无内毒素水。
2.3 阳性对照液:即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
2.4样品阳性对照液:即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。
三:内毒素检测3.1 鲎试剂的溶解:按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡,溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
3.2样品溶液的制备
样品有效稀释倍数(MVD)的计算:
MVD= C•L/λ
λ:测SY鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL);L:样品细菌内毒素限值;C:样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时,C的单位为1mL/mL;当L单位为EU/mg或者EU/U时,C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积,加无内毒素水制备样品溶液。
3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。
封闭管口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。
3.4 结果判断
3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。
3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性,实验方有效,否则无效。若阴性对照管为阳性,提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性,提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低,鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确,或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在。
四:其他常用实验方案4.1 鲎试剂灵敏度复核实验
当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时,应按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“鲎试剂灵敏度复核实验”进行实验。按照下式复核灵敏度:λ=lg-1(ΣX/4),当0. 5λ≤λ ≤2.0λ时,鲎试剂灵敏度复核合格,检测时仍以标示灵敏度λ为准。
4.2样品的干扰实验
当鲎试剂、样品的来源、配方、生产工艺或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时,须按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“干扰实验”进行干扰实验。以样品代替无内毒素水为溶剂,配制2λ,λ,0.5λ,及0.25λ的内毒素系列标准溶液进行灵敏度复核。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之间(包含0.5 λ及2 λ),则认为在此实验条件下样品无干扰。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之外,则认为在此实验条件下样品有干扰,需对样品进行稀释(稀释倍数不得超过有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰。
4.3凝胶限度实验
凝胶限度实验用于判断样品的内毒素含量是否超过药典所规定的细菌内毒素限值。按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶限度实验”进行实验。在实验有效的情况下,如果样品管的两个平行管均为阴性,判定样品的内毒素含量小于药典规定限值。如果样品管的两个平行管均为阳性,判定样品的内毒素含量不符合药典规定。如果样品管的两个平行管一管为阳性,另一管为阴性,需进行复试。复试时,样品需做4个平行管,若所有平行管均为阴性,判定样品符合规定,否则判定样品不符合规定。
4.4凝胶半定量实验
本方法系通过确定反应终点浓度来量化样品中内毒素含量。详见《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶半定量实验”。
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温馨提示:不可用于临床ZL。