特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括北京三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:北京三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家
等级:科研试剂
编号:SYA138
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
北京三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
叶绿素铜*盐 4′-Chloroacetanilide 11006-34-1
ARB12094 大鼠心肌特异性肌*蛋白T(cTnT)含量检测 Rat cardiac isoform of tropnin t,ctnt ELISA KIT
PY01-041 维生素B12 1克
ARB12883 小鼠丙*(代"酮")酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa测定使用说明书 Mouse pyruvate kinase,m2-pk ELISA KIT
PY04-092 甲氧苄*嘧啶乳酸盐 2mg/支×10支 每支添加于100ml Bolton肉汤基础中,用于弯曲杆菌的增菌培养
聚乙*(代"烯")醇甘油封片剂 5ml|10ml
ARB12823 小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa检测说明书 Mouse interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
ARB11225 人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)代做ELISA实验 Human intercellular adhesion molecule 2,icam-2 ELISA KIT
BL0763 RQ1 Rnase-Free Dnase
ARB10162 人S蛋白100P(S-100P)Elisa方法检测 Human s-100p ELISA KIT
L-*丙*酸 MMC 63-91-2
B1101 小牛血清(辐照灭菌)
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620-45-1 2,6二*酚靛酚* 2,6-Dichloroindophenol sodiu*(代"m") salt hydrate
PY02-180 赖*酸脱羧酶培养基 5克
多聚甲醛溶液(6% PFA) 500ml
ARB11361 人类粘蛋白(ORM)尿液中含量检测 Human orosomucoid,orm ELISA KIT
考马斯亮蓝快速染色液 "100ml
NF-222 羊抗人AFP
2-*基-2-甲基-1-丙醇 Adenine hydrochloride 124-68-5
ARB11843 人凝血因子Ⅻ(FⅫ)Elisa方法检测 Human coagulation factor Ⅻ,fⅫ ELISA KIT
9012-90-2 Taq DNA 聚合酶
ARB13909 猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)酶标法分析 Porcine angiotension Ⅱ,ang-Ⅱ ELISA KIT
β-淀粉酶 SE 9000-91-3
F030406 胶体金标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*GOLD
PY01-018 牛胆酸* 25克
虾青素 Fluconazole 472-61-7
73049-73-7 胰蛋白胨 Tryptone
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·水稻转基因Cry1Ac单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA273
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·羊源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA301
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪乙型脑炎病毒(JEV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA419
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
该方法采用一步法荧光qRT-PCR,反应在同一管内连续进行,操作简单,并有效防止了污染,能对样品中的猪乙型脑炎病毒进行快速检测,具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。
二、用途:
该试剂盒适合于检测发病动物血液、脑脊液、组织以及病毒细胞培养液等标本中猪乙型脑炎病毒(JEV)RNA,适用于猪乙型脑炎病毒(JEV)感染的辅助诊断。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
JEV荧光qRT-PCR反应液(JEV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
6、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
适用标本类型:发病动物的血液、体液、脑脊液、组织以及病毒培养物等标本。
6.1.1 组织:取发病组织约1g,置入1.5mL洁净EP管,立即送检。
6.1.2 血液、体液、脑脊液及病毒培养物:血液,无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;体液、脑脊液及病毒培养物液等,无菌条件下取0.5-1mL左右,置入1.5mL洁净EP管,立即送检。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(JEV-qRT-PCR MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),测试反应体系配制如下:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(JEV-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC): 不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(JEV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明JEV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明JEV核酸阴性。
(3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行JEV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明JEV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家。
温馨提示:不可用于临床ZL。