特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家现货在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家现货
品Pai:百奥莱博
等级:科研试剂
规格:48次/盒
产地:国产|进口
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·贝氏柯克斯体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA133
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适合于检测全血等样本中的贝氏柯克斯体通用,用于贝氏柯克斯体通用感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对贝氏柯克斯体通用特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对贝氏柯克斯体通用的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
组分 | 数量 | 规格 |
贝氏柯克斯体反应液(qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
贝氏柯克斯体阳性对照(PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:一、样品采集:
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管,取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
二、
DNA提取:可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
三、
检测步骤:1.
试剂的准备从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
酶混合物 | 1 µL | N×1µL |
总量 | 15 µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.
qPCR反应条件将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 minPCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、
结果分析:1.
结果分析条件设定直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
2.
试验成立判定➤阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照:均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
3.
结果判定➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明贝氏柯克斯体核酸阴性。
➤如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行贝氏柯克斯体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、
注意事项:➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒厂家现货关键词:恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA137
SJ0857 胎牛血清(无支原体)
亮绿SF(淡黄) Gelatin Sepharose 4B 5141-20-8
蜗牛酶 t-RNA
BL0920 RBITC标记兔抗人IgM抗体
NF-219 羊抗人B因子血清
乙酸*溶液(3mol/L,pH4.8,无菌) 500ml
ARB10326 人内皮素1(ET-1)elisa检测说明书 Human endothelin 1,et-1 ELISA KIT
PY01-074 蔗糖 500克
SB培养基粉剂(Super Broth) 1L
830-81-9 乙酸-1-奈脂 1-Naphth 1 acetate
DN1401 植物基因组DNA快速提取试剂盒
胰蛋白酶-CaCl2溶液(0.1%) 100ml
F030402 胶体金标记小鼠抗人IgG Fc抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(FC)*GOLD
108-95-2 TRIS饱和酚
没食子酸正丙酯 Acetoacetanilide 121-79-9
BL1159 无内毒素质粒大量提取试剂盒
BTN100203 通用型LAMP试剂盒 Universal LAMP Amplification Kit
75-12-7 甲酰胺 Formamide
F040312 小鼠IgA抗原 Mouse IgA
ARB10971 人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)elisa检测说明书 Human receptor Ⅱ for the fc region of immunoglobulin g,fcγrⅡ ELISA KIT
无内毒素质粒大提试剂盒
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·西部马脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA235
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA662
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·空肠弯曲菌/结肠弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA100
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·嗜麦芽窄食单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA047
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·诺如病毒G2型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA202
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·卵形疟原虫单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA126
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、
简介:本试剂盒用一对卵形疟原虫特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR探针技术进行卵形疟原虫的检测。
二、
用途:本试剂盒可用于卵形疟原虫检测鉴定及突发公共卫生事件的处置,还可用于卵形疟原虫的环境监测、卫生检疫及感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、
试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
卵形疟原虫荧光PCR反应液(qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(DNA Polymerase MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
卵形疟原虫阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、
荧光PCR 仪器适用范围ABI 系列,Bio-Rad 系列,Roche 系列等荧光定量PCR 检测仪等。
五、
储存条件及有效期:本试剂盒于-20℃保存,避免反复冻融,有效期为6 个月。
六、实验操作步骤
6.1 标本采集
血液: 用一次性无菌5ml 注射器抽取疑似人或动物血3-5ml,置于枸橼酸*或EDTA2Na 抗凝管中,摇匀送检。
肺脏等组织:取上述组织1g左右,置于1.5ml洁净EP管中送检。
乳液、体液等标本:取相应标本3-5ml,转至1.5ml洁净EP管中送检。
6.2
DNA提取可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
血液样本:直接取200μl 抗凝血,转至一洁净的1.5ml 离心管中,加入1ml 双蒸水,剧烈震荡30s,8000rpm 离心5min,弃上清,至无明显红色沉淀。(若沉淀明显,请再重复上述步骤一次)。加入1ml生理盐水,剧烈震荡15s,13000rpm 离心5min,弃上清。沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
肺、淋巴结等固体组织:剪取约0.1g 组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入0.5mL TE 转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50μl 转移到1.5mL 离心管中,加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl 进行PCR 反应。
乳液等液体标本:取标本2-3mL,13000rpm 离心3min,弃上清,沉淀加入50μl 核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀)并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min,取上清4μl进行PCR 反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。
七、
检测步骤:7.1 PCR 扩增
从试剂盒中取出荧光PCR 反应液(卵形疟原虫-qPCR MIX)、酶混合物(DNA Polymerase MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2
qPCR反应条件将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、
结果分析:8.1
结果分析条件设定直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2
试验成立判定阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
阳性对照(PTC):均产生扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3
结果判定在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明卵形疟原虫核酸阳性。
Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明卵形疟原虫核酸阴性。
如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行卵形疟原虫real time PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明卵形疟原虫核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、
注意事项:(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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温馨提示:不可用于临床ZL。