特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的RIPA裂解液(中)现货供应用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多RIPA裂解液(中)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:RIPA裂解液(中)现货供应
规格:100ml
编号:SY0316
品Pai:百奥莱博
英文名:RIPA Lysis Buffer (Medium)
本品属于裂解强度居中的RIPA裂解液,含有sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种YZ剂,可以有效YZ蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的ZZ浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
我公司的RIPA裂解液(中)现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
ARB14254 猪细胞色素P450(CYP450)酶标法分析
多聚右旋赖*酸 DFIH 27964-99-4
F030841 BIOTIN标记小鼠抗鸡IgY(IgG)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Chicken IgY*BIOTIN
Top10化学感受态细胞 20×100ul
9008-22-4 Laminarin 昆布多糖
BTN131210 耐热型MMLV逆转录酶(H-) Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase(H-)
钨酸铵 4-Hydroxypyridine 11120-25-5
APES玻片硅化试剂 100ml|500ml
ARB13920 猪角化细胞生长因子(KGF)尿液中含量检测 Porcine keRatinocyte growth factor,kgf ELISA KIT
ARB11953 大鼠I型胶原交联羧基末端肽(ICTP)代做ELISA实验 Rat cross-linked carboxy-terminal teloPeptide of type i collagen,ictp ELISA KIT
棕榈油酸甲酯 4-Phenylazophenol 1120-25-8
PY08-049 GVPC琼脂 9CM 10皿/盒,用于选择性分离培养军团菌
F040302 人IgG抗原 Human IgG
146-68-9 INT 碘硝基*化四氮唑蓝
RIPA裂解液(中)现货供应关键词:SY0316,RIPA裂解液(中),RIPA Lysis Buffer (Medium)
·SREBP荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0063
英文名称:SREBP luciferase reporter plasmid
规格:1μg
SREBP-Luc荧光素酶报告质粒(报告基因质粒)(SREBP luciferase reporter plasmid)是用于检测SREBP转录活性水平为目的的报告基因。SREBP(Sterol-regulatory element binding proteins)主要是脂类代谢的调节者。SREBP的调节失控可能会引起一些代谢性疾病,如肥胖、二型糖尿病、心血管疾病和脂肪肝等。
SREBP报告基因主要用于检测SREBP途径的转录活性、药物研究以及过表达基因和RNAi的表型分析等。
pGMSREBP-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个SREBP结合位点,可以高灵敏度地检测SREBP的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得SREBP报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
1.pGMSREBP-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
2.SREBP的激活剂,可作为SREBP报告基因的阳性对照。
储存条件:-20℃。
·内质网红色荧光探针(活细胞)
编号:SY0591
英文名称:Endoplasmic Reticulum Red (TR Glibenclamide), for live-cell imaging
规格:20μl(1mM)
本系列探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。
本品由红色荧光染料TR和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 587 nm,Em= 615nm。格列本脲(Glibenclamide, glyburide),一种常用降血糖药物,在胰岛β细胞、胰岛素的分泌、心肌衰竭细胞功能以及心律不齐的研究等方面具有重要科研用途。格列本脲高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲受体,且本受体富集存在内质网上,因此适合用作内质网荧光探针。本品为溶于DMSO的探针储存液,推荐工作浓度为~1μM。
分子式:C44H42BClF2N6O7S2
分子量:915.23
外观:液体
Ex/Em:587/615nm
滤片:TRITC
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期6个月
结构式
RIPA裂解液(中)现货供应关键词:SY0316,RIPA裂解液(中),RIPA Lysis Buffer (Medium)
·27mm透析袋(透析分子量50kDa)
编号:SY0415
英文名称:Dialysis Tube MD34 (Mw50,000)
规格:1卷(1米)
透析袋通常为半透膜制成的袋状,以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换,透析的主要原理是:透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外,直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析。
本透析袋参数:扁平宽度为34mm,直径27mm,截留分子量50kDa。
储存条件:4℃,有效期2年。
注意事项
1)每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,具体长度需根据待透析的样品而定。
2)在大体积(eg.500mL)的2%(W/V)的碳酸**和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3)用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4)放在大体积(eg.500mL)的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5)冷却后,存放于4℃,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。【注】:从此时起取用透析袋必须戴手套。
6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7)使用时,一端由透析夹夹紧,另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液。
【注】:
① 通常要留1/3~1/2的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大或样品含盐量较高时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大,如大烧杯等。
我公司正在打折促销蛋白质研究全系列产品,恭候您的咨询选购RIPA裂解液(中)现货供应。
温馨提示:不可用于临床ZL。