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名称:Cre 重组酶厂家价格
规格:250U|250U|50U
产地:国产|进口
编号:SV1132
品Pai:百奥莱博
英文名:Cre recombinant enzyme
特性:
两个 loxP 位点之间 DNA 的切割
含 loxP 位点 DNA 分子的融合
loxP 位点之间 DNA 序列的翻转
概述:
Cre 重组酶是细菌噬菌体 P1 的 I 型拓扑异构酶,催化 loxP 位点间的 DNA 进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre 介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP 识别一个 34 bp 序列,其两端是两个 13 bp 的反向重复序列,中间是起定向作用的 8 bp 间隔区。重组产物根据 loxP 位点的位置和相对方向而不同,两个含单 loxP 位点的 DNA 将被融合。两个正向重复 loxP 位点间的 DNA 将以环状形式切割,而两个反向 loxP 位点间的 DNA 序列将被翻转。
来源:
纯化自重组 E. coli 菌株,其携带有编码细菌噬菌体 P1 的 Cre 重组酶的质粒,酶的 N 端添加了丙*酸和甘*酸残基。
反应条件:
1X Cre 重组酶反应缓冲液
[33 mM NaCl,50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 10 分钟。
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,30 分钟使 0.25 μg 的 pLox2+ 对照 DNA 产生ZD位点特异性重组所要的酶量。ZD重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后进行*苄抗性平板筛选。
浓度:
1,000 units/ml。
注意事项:
建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将 Cre 重组酶反应混合物于 70℃ 温育 10 分钟。
由于 Cre 重组酶反应是一个动态平衡过程,用 loxP2+ 对照底物仅有 20-30%发生重组。由于重组产物的量较少,故*化乙锭染色后呈现微弱条带,同时伴有底物染色强度相应减弱。
延长温育时间不会提高重组效率,反而还可能导致大分子量重组产物的生成。
反应中增加 Cre 重组酶量将形成 loxP 依赖性 Cre-DNA 复合物,从而YZ重组反应。
对照 DNA:
线性化 pLox2+ 长 3,625 bp,距两端 400 bp 处各有一 loxP 位点。两 loxP 位点之间有一复制原点和一个*苄青霉素抗性基因。loxP 位点之间的重组产生一个环状(2,787 bp)的*苄青霉素抗性质粒(0.8% 琼脂糖凝胶电泳约 1.7 kb 大小)和一个 838 bp 长的 DNA 片段。
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2×Taq PCR MasterMix 500μl|5×500μl
Cre 重组酶厂家价格关键词:Cre recombinant enzyme,SV1132,Cre 重组酶
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·Bst 2.0 DNA 聚合酶
编号:SV0940
规格:8KU|8KU|1600U
特性:
ZJ DNA 等温扩增(LAMP)性能
快速聚合
反应条件灵活,比 Bst DNA聚合酶具有更高的盐耐受力
6 0 - 7 2℃ 之间具有ZJ反应性能(WarmStart)
用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响
WarmStart DNA聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率
概述:
Bst 2.0 DNA聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶 I,大片段(Bst DNA聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA聚合酶具有 5´→3´的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。
Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以YZ酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。
我公司的 Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下YZ酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶不需要单独的激活步骤。
Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA聚合酶或同源物可以在无模板的情况下,掺入核苷酸。
·核酸内切酶 V
编号:SV1118
英文名称:Nucleic acid enzyme V
规格:1250U|250U
特性:
切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸
切割错配
概述:
核酸内切酶 V 是在 E. coli 中发现的一种 DNA 修复酶。它识别 DNA 中的脱氧次黄嘌呤核苷,即脱氧腺苷的去*基产物。核酸内切酶 V,也称为脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 内切酶,识别含脱氧次黄嘌呤核苷(无论配对与否)的双链或单链 DNA。也可识别含脱碱基(AP)位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flaps 和类 -Y 型结构的 DNA,但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶 V 发挥 DNA 修复功能时,还需另外一种蛋白的存在,因为它不能切除 DNA 上的脱氧次黄苷或受损碱基。
核酸内切酶 V 对错配脱氧次黄嘌呤核苷 3´ 端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割,切割第二个磷酸二酯键的效率是95%,第三个磷酸二酯键的效率是 5%,产生一个 3´ 羟基、5´ 磷酸的切刻。
来源:
重组 E. coli 菌株,携带有 Endo V 基因与编码麦芽糖结合蛋白(MBP)基因的融合基因。融合蛋白纯化后具有生物活性。该蛋白含 223 个*基酸,分子量为 24.9 kDa。
反应条件:
1X BalbBuffer 4
[50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:65℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 V 经过严格的质控检测,确保该产品具有ZG的活性和纯度。详情请联*(代"系")我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内能够切割 1 pmol 含单脱氧次黄嘌呤核苷位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请联*(代"系")我们咨询。
* 脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备:合成 34 mer 寡核苷酸双链时,在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷(dI)碱基。
浓度:
10,000 units/ml。
Cre 重组酶厂家价格关键词:Cre recombinant enzyme,SV1132,Cre 重组酶
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温馨提示:不可用于临床ZL。