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北京百奥莱博专业生产供应北京现货Dylight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)促销,我公司销*(代"售")全品类的抗体抗原,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货Dylight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)促销
品Pai:百奥莱博
规格:0.1ml
产地:国产|进口
本DyLight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)用于免疫荧光染色时的推荐稀释比例为1:200。实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节荧光标记二抗的稀释比例,推荐的调节范围为1:50-200。
DyLight 405是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。它比绝大部分常用的蓝色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。由于很多荧光检测仪器缺少400nm左右的激发波长,DyLight 405常局限于激光共聚焦显微镜下观察。DyLight 405的吸收峰400nm、发射峰421nm。
本抗体为用纯化的小鼠IgG免疫山羊,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化,并经过人IgG、牛IgG(bovine IgG)、马IgG(horse IgG)、兔IgG、猪IgG(swine IgG)吸附纯化的优质二抗。对人IgG、牛IgG(bovine IgG)、马IgG(horse IgG)、兔IgG、猪IgG(swine IgG)几乎没有结合能力。特别适合于对于二抗种属特异性要求比较高的荧光染色实验。
本抗体如果用于常规的免疫染色,以每次检测需1毫升1:200稀释的荧光标记二抗计,至少可以检测20次。如果适当重复使用已经使用过的荧光标记二抗,至少可以多检测60-100次。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
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·Ad-mCherry-GFP-LC3B
编号:YT160
英文名称:adenovirus expressing mCherry-GFP-LC3B fusion protein
规格:1ml|10×1ml
本品是一种可以表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒,可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬的检测。
LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族,其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止,LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个*基酸残基的蛋白,在蛋白合成后,被Atg4所酶切而失去了C端的22个*基酸蛋白,从而暴露出C端的甘*酸,人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中,其C端暴露的甘*酸经过一个类似泛素化的过程,以ATG7为E1样激活酶, 以ATG3为E2样连接酶,以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶,在C端甘*酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同,LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后,自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切,而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大,但由于其极强的疏水性,在SDS-PAGE电泳时,LC3B II比LC3B I迁移得更快,其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以斑点的形式表现出来。
自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等不利的环境条件下, 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。
Ad-mCherry-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒,感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的红色和绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。
自噬小体在与溶酶体融合过程中,溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭,这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚(mushroom coral)的单体红色荧光蛋白,当其与GFP进行LC3B的共同标记时,在GFP被溶酶体酸性环境所淬灭的情况下,可以发出红色荧光的mCherry因为其ZY的稳定性而被保留。因此,通过融合表达mCherry-GFP-LC3B蛋白,可以非常有效地追踪自噬过程。在用Ad-mCherry-GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B以弥散的黄色荧光(mCherry和GFP的综合效果)形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下mCherry-GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以黄色斑点的形式表现出来(LC3B dot or punctae);当自噬体与溶酶体融合后,因GFP荧光的部分淬灭而以红色斑点的形式表现出来。
腺病毒感染细胞后为瞬时表达,通常不会与基因组DNA重组,不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后,有效表达时间通常不少于7天,不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。
百奥莱博的Ad-mCherry-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统,感染普通的细胞后不能进行扩增和重组,从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。
本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。
本产品的滴度≥1×108 pfu/ml,使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞,每孔50万细胞计算,共可以感染10个孔;如果按照20 MOI感染24孔板的细胞,每孔10万细胞计算,共可以感染50个孔。如果MOI值提高,则相应可以感染的孔数会减少;如果MOI值降低,则相应可以感染的孔数会增加。
注意事项:
1. 反复冻融会降低病毒滴度,如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体,请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1),没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病,可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。
储存条件:-20℃,有效期1~2个月。
北京现货Dylight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)促销关键词:Dylight 405标记抗小鼠IgG(H+L)二抗,Dylight 405标记二抗,山羊抗小鼠二抗,小鼠IgG(H+L)抗体
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四乙基*化铵 Hydrindantin dihydrate 56-34-8
Tris-*化铵红细胞裂解液 100ml|500ml
ARB13570 兔子白介素1(IL-1)elisa检测 Rabbit interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
蜂蜡 POPSO-2Na 8012-89-3
BTN130537 *蛋白酶YZ剂Ⅰ溶液 Calpain InhibitorⅠSolution
F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RAC
F050322 绵羊IgG抗体 Sheep IgG
ARB12429 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)Elisa方法检测 Rat bone morphogenetic protein 2,bmp-2 ELISA KIT
PY04-052 TCH(噻*(代"吩")-2-羧酸酰肼) 0.5 mg/支×10支 加入100ml改良罗氏(L-J)培养基基础中制成TCH培养基,用于分枝杆菌菌型鉴定
BL0776 Matrigel(基底胶)
真菌蛋白提取试剂盒 Fungal protein extraction kit 50T|100T
5,5-二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲*(代"酸") Non-fat Powdered Milk 69-78-3
北京现货Dylight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L)促销关键词:Dylight 405标记抗小鼠IgG(H+L)二抗,Dylight 405标记二抗,山羊抗小鼠二抗,小鼠IgG(H+L)抗体
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植物血球凝集素 Sodium hexacyanoferrate (II) 9008-97-3
CYB162046 兔抗牛IgG(抗血清) 0.5ml
芴甲氧羰基-L-天冬*酸β-叔丁酯 ONPG 71989-14-5
ARB14134 甘薯脉花叶病毒(SPVMV)酶免分析
PY01-012 酵母浸粉 250|500克
ARB12439 大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA检测服务 Rat osteoprotegerin ligand,opgl ELISA KIT
ARB13185 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)代做ELISA实验 Mouse insulin-like growth factor 1,igf-1 ELISA KIT
γ-L-谷*酰对硝基*(代"*")胺一水合物 Cresyl Violet acetate 24032-35-7
ARB12158 大鼠白介素1受体拮抗剂(IL1RA)Elisa方法检测 Rat interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
ARB12695 大鼠凝血酶受体(TR)检测服务 Rat thrombin receptor,tr ELISA KIT
PY01-143 脱氧胆酸 25克
DL2000 DNA Marker Uridine
ARB10587 人血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)尿液中含量检测 Human thrombospondin 1,tsp-1 ELISA KIT
ARB11825 人缪勒管YZ物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)Elisa定量检测 Human mullerian inhibiting substance/anti-mullerian hormone,mis/amh ELISA KIT
BL1255 DL15000 DNA Ladder
SJ0860 胎牛血清
I-卡拉胶 2- Methoxyphenol 9062-07-1
间甲氧基*乙*(代"酸") Carboxymethyl cellulose CM-23 1798-09-0
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(7-15万)
DNA Marker(100~2000bp)
BL0881 兔抗大鼠IgG免疫血清 0.5ml
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-乙磺酸*盐 PHBA 75277-39-3
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