20×SSC缓冲液，pH5.3批发

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名称：20×SSC缓冲液，pH5.3批发
英文名：saline sodiu*(代"m") citrate
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
SSC缓冲溶液是分子生物学中最标准的印迹和杂交处理溶液，旨在用于各种杂交实验达到变性和清洗的目的，主要成分为*化*和柠檬酸*。SSC缓冲液中柠檬酸*起缓冲作用，盐离子(Na )中和核酸主链上的负电荷，使其呈电中性，这样可以使探针和靶序列的结合比较容易进行。也用于SDS-PAGE电泳分离胶配制。用于核酸杂交，不同浓度作用不同：常用2×，及0.5×

2×SSC：高盐洗膜，洗去部分非特异性结合的探针。
0.5×SSC：低盐洗膜，增加核酸链的严紧性，使得 RNA/DNA 之间的排斥力增加。
本产品为20×浓缩液，经过滤高压CJ处理，可根据实验要求使用去离子水直接稀释使用。

储存条件：常温

欲咨询购买20×SSC缓冲液，pH5.3批发，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·D-(+)-麦芽糖
编号：QN0193
英文名称：D-(+)-Maltose monohydrate
规格：100g
别名：淀粉糖;饴糖;Malt
CAS号：6363-53-7
分子式：C12H22O11·H2O
分子量：360.31
储存条件：室温
纯度：≥98%
性状：无色结晶
溶解性：溶于水，参考浓度50mg/ml。

·直链淀粉
编号：QN0199
英文名称：Amylose
规格：250mg
本品常用作α-淀粉酶底物。

CAS号：9005-82-7
分子式：(C6H10O5)n
储存条件：室温干燥保存
性状：白色或类白色粉末
类型：Type III
杂质：支链淀粉，essentially free ≤10% 丁醇
溶解性：溶于0.05M NaOH，参考浓度1mg/ml

·盐*(代"酸")胍
编号：QN0650
英文名称：Guanidine HCl
规格：500g
盐*(代"酸")胍是常用的分子生物学试剂，常用作蛋白变性剂。

别名：盐*(代"酸")亚*脲
CAS号：50-01-1
分子式：CH5N3· HCl
分子量：95.53
性状：白色结晶性粉末
储存条件：室温干燥保存

(1)作为蛋白质变性剂，可以溶解一些不溶的或变性蛋白质，例如内涵体;也可用于活性蛋白或酶的初始折叠。
(2) 作为提取细胞总RNA实验中的强烈变性剂。盐*(代"酸")胍溶液可溶解蛋白质，导致细胞结构破坏，核蛋白二级结构破坏，从核酸上解离下来。还能够充分YZ细胞和整个组织的核糖核酸酶活性。 由于其生物学上的破坏特性，常称含有盐*(代"酸")胍或者硫*酸胍的缓冲液为离液缓冲液。


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·DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)
编号：QN1162
英文名称：Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗小鼠IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长ZZ漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。


20×SSC缓冲液，pH5.3批发关键词：QN1057,20×SSC缓冲液，pH5.3,saline sodiu*(代"m") citrate


·Pfu DNA 聚合酶
编号：QN0965
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：500U|1000U|10KU
本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcusfuriosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白，其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性，它能纠正DNA扩增过程中产生的错配，而传统的Taq酶却不能，其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能，但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率ZD的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性，PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟，比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好，95℃ 1小时仍保持90%以上的活性，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端，可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。

Pfu来源：表达Pfu DNA聚合酶的大肠杆菌。
Pfu酶储存缓冲液：50mMTris-HCl，pH 8.2;0.1mM EDTA;1mM DTT;0.1% Nonidet P40;0.1% Tween 20;50% 甘油。
Pfu单位定义：在74℃条件下，30分钟内催化10 nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。
Pfu用途：1)常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增;
2)基因定点突变和拼接。
Pfu注意事项：
1、 酶浓度：建议在50ml的体系中使用1.25个单位的Pfu DNA聚合酶，因为酶存在3’-5’外切酶活性，高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。在加完dNTP后再添加Pfu DNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。
2、延伸时间：Pfu DNA聚合酶的延伸速率低于Taq DNA聚合酶，大约为一分钟600个碱基(Taq DNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基)，因此建议扩增1Kb的DNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言，25～35个扩增循环就足够了。
Pfu保存：-20℃保存至少一年。

别名：Pfu DNA 聚合酶
英文名称：Pfu DNA Polymerase
储存条件：-20
性状：液体

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