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名称:限制性内切酶HinfI优惠
英文名:HinfI Restriction Endonuclease
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN17-0090
规格:2000 U
HinfI限制性内切酶识别位点:
5´...G↓A N T C...3´
3´...C T N A↑G...5´
产品组成:
成分 | 规格 |
HinfI,10U/μL | 2000U |
Buffer A,10× | 1.0mL |
Buffer B,10× | 1.0mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存。
贮存Buffer:10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃),100mM KCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.2mg/mL BSA,50% glycerol。
1×Buffer A:10mM Tris-HCl(pH8.5),10mM MgCl2,100mM KCl,0.1mg/mL BSA。
1×Buffer B:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM 醋酸*,66mM 醋酸*,0.1mg/ml BSA。
活性定义:一个活性单位是指50μL反应体系中,37℃条件下,1小时内将1μg的lambda DNA片段完全分解所需的酶量。
热灭活:65℃加热20分钟
使用方法:1.单酶切DNA:
①在离心管中加入下列溶液:
成分 | 用量 |
nuclease-free water | 16μL |
10×Buffer A | 2μL |
DNA(0.5-1μg/μL) | 1μL |
HinfI | 0.5-2μL |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2.双酶切或多酶切DNA:
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer),然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3.直接酶切PCR产品:
①在离心管中加入下列溶液:
成分 | 用量 |
PCR reaction mixture | 10μL(约0.1~0.5μg DNA) |
nuclease-free water | 18μL |
10×Buffer A | 2μL |
HinfI | 1-2μL |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
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2×Taq PCR Mastermix
二吡*(代"咯")烷基(N-琥珀酰亚*氧基)碳六*磷酸盐 Chromic potassiu*(代"m") sulfate dodecahydrate 207683-26-9
90-33-5 4-Methylumbelliferone 4-甲基伞形酮 4-MU
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103476-89-7 Leupeptin 亮抑酶肽(原装)
573-58-0 刚果红 Congo Red
限制性内切酶HinfI优惠关键词:限制性内切酶HinfI,HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090
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ARB10624 人血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA代测服务 Human plasma fibronectin,pfn ELISA KIT
56-40-6 Glycine 甘*酸
CYB161001 人IgG(冻干粉)
ARB11251 人胃肠癌标志物CA199含量分析 Human gastrointestinalcancer marker-ca199 ELISA KIT
聚甲基丙*(代"烯")酸甲酯 Sodium hydrogen phthalate 9011-14-7
PY02-210 胰-亚硫*(代"酸")盐-环丝*酸琼脂基础 250克
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2-**甲*(代"酸") 5-IDC 118-91-2
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限制性内切酶HinfI优惠关键词:限制性内切酶HinfI,HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090
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·AEBSF溶液(10mg/mL)
编号:BTN130544
英文名称:AEBSF Solution
规格:5mL
本产品为浓度是10mg/mL的AEBSF水溶液,工作浓度为0.1-1.0mg/mL。4-(2-*乙基)*磺酰*盐*(代"酸")盐(4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride,Pefabloc SC),分子量是239.5,溶于水,无毒,在低pH条件下,比PMSF更稳定。它是一种水溶性的不可逆的丝*酸蛋白酶,可以YZ胰凝乳蛋白酶,激肽释放酶,血纤维蛋白溶酶,凝血酶和胰蛋白酶。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期3个月。
·沉淀型TMB显色试剂盒
编号:BTN101106
英文名称:Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格:100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。
产品特点:1.相对于DAB来说,灵敏度高。
2.色泽稳定,无须避光显色。
3.色带为蓝色,便于观察。
4.无毒环保,可以放心使用。
产品组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 100ml |
溶液B | 100ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
使用方法:一、免疫印迹染色
1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
5.空气中晾干。
6.拍照记录。
二、免疫化学染色
1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
5.小心移去切片上显色工作液。
6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
8.放上盖玻片或封片。
9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。
注意事项:1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能存在。
4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。
疑难解答:Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q:如何降低背景读数?
A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。
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温馨提示:不可用于临床ZL。