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百奥莱博专业生产销*(代"售")酵母tRNA溶液(精提)北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:酵母tRNA溶液(精提)北京价格
规格:1.5mL
编号:BTN70904B
产地:国产|进口
英文名:Yeast tRNA Solution
品Pai:百奥莱博
本产品分A和B两个规格,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的*仿,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果ZH得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。
二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
盐 | 终浓度 |
NH4OAc(醋酸铵) | 0.5M |
NaCl(*化*) | 0.25M |
NaOAc(醋酸*) | 0.3M |
2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。
三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。
酵母tRNA溶液(精提)北京价格正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·生物素
编号:BTN131092
英文名称:Biotin
规格:1g
生物素为B族维生素之一,又称维生素H、维生素B7、辅酶R,CAS号为58-85-5,分子式为C₁₀H₁₅N₂O₃S,分子量为243.3。游离的生物素常被用于从亲和素柱子纯化生物素化复合物的洗脱缓冲液中。其在用HABA染料测量生物素化程度的过程中可以被用来作为参考标准。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·Orth固定液
编号:BTN140411
英文名称:Orth Fixative Solution
规格:250mL
该固定液固定组织较缓慢,不适合作为临床的活检固定液,4毫米厚的组织固定时间需36-72小时,该液对于染色质的固定好,显示清晰,但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。
该固定液不能沉淀蛋白质,它必须和醋酸配成混合固定液。它不能长期固定组织,经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ
编号:BTN130430
英文名称:E.coli DNA Polymerase I
规格:500U
大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymeraseⅠ),1956年由Arthur Kornberg首先发现的DNA聚合酶,又称Kornber酶。纯化的DNA polⅠ由一条多肽链组成,约含1000个*基酸残基,分子量为109KD。含有一个二硫键和一个-SH基。
图注:左图为Klenow片段,右图为大肠杆菌DNA聚合酶Ι
产品组成: 成份 | 规格 |
DNA聚合酶I(10000U/μL) | 50μL |
10×工具酶通用缓冲液 | 1mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
产品特点:1.除具有5´→3´DNA聚合酶功能,还具有5´→3´外切酶活性,3´→5´外切酶活性,焦磷酸解作用和焦磷酸交换作用。
2.可应用于切口平移和cDNA第二链合成。
3.本品不含DNase I,因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。
单位定义:1单位指37℃条件下,30分钟内能催化10nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
反应条件:1×Buffer [10mM Tris-HCl,50mM NaCl,10mM MgCl2,1mM DTT(pH7.9@25℃)]。加入dNTPs(不随酶提供)。
Buffer成分:25mM Tris-HCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50% Glycerol,pH7.4 @25℃
热失活:75℃ 20分钟。
酵母tRNA溶液(精提)北京价格关键词:Yeast tRNA Solution,酵母tRNA溶液(精提),BTN70904B
·茜素红S染色试剂盒
编号:BTN121105
英文名称:Alizarin Red S Staining Kit
规格:100mL
茜素红S染色试剂中的茜素红S可通过与*离子和其他金属离子发生鳌和反应而形成可以在显微镜下直接观察的带颜色的复合物。本产品就是基于此原理而开发。
产品特点:1.即开即用,用户不需要单独准备各种溶液。
2.操作简捷,性能稳定,显色清晰。
3.可用于组织切片中的*沉积,尤其适用于骨细胞或组织的病理和生理研究。
4.可用于检测动物原生代或培养细胞的*沉积。
5.本产品为通用型,不但用于*离子的检测,还可用于FeCl2和CdCl2的检测。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
茜素红S染色 | 100ml |
茜素红S pH调节液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:注意:试剂具有腐蚀性,操作时须带手套。实验时可以用含金属离子的切片或培养细胞作为阳性对照。可溶性蛋白会干扰茜素红S与*的相互作用,所以样品必须经过固定处理(以去除细胞中的可溶性蛋白)。对培养细胞,还必须洗涤去掉培养基(含血清等蛋白成分)。茜素红S与*的螯合反应需要在水相发生,因此加入茜素红S 前用水溶液洗涤掉前面操作所残留的有机溶剂。
一、
茜素红S染色液的准备1、根据所需检查的金属离子按下表选择茜素红S染色液的ZJpH。
金属离子 | ZJPH | 呈现的颜色 |
CaCl2,CaPO4、CaCO3 | 4.28-6.75 | 橙红 |
FeCl2 | 5.62-8.05 | 深紫 |
CdCl2 | 5.11-5.78 | 品红 |
2.用茜素红S pH调节液将茜素红S染色液调到所需的pH值。
二、
染色载片上细胞3.用缓冲中性、-乙醇混合液或乙醇作为固定剂固定铺在载玻片上的细胞(本试剂盒不提供上述固定剂)。
4.将细胞放入95%乙醇中处理。
5.将载玻片在空气中干燥。
6.将载玻片放在装有茜素红S染色液的染色缸中染色1-5分钟。注意:此步需要密切控制,每隔一分钟放在显微镜下检测,ZJ时间随样品中盐离子的多少不同而不同。
7.用蒸馏水洗涤载片一次。
8.用丙*(代"酮")浸泡载波片30秒。
9.用丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)浸泡浸泡载波片15秒。
10.肉眼可见红色或紫色(取决于所检查的离子)即可终止染色,放光学显微镜观察。*沉积阳性细胞将呈现桔红色。
三、
染色石蜡包埋切片11.按常规方法进行固定、包埋、切片、脱蜡和水化等操作,直到70%乙醇处理这步。注意:固定剂使用4%的副甲醛或10%,切片厚度在0.4μm。
12.将切片浸入蒸馏水中。
13.将切片浸泡在茜素红S染色液中30秒-5分钟,具体时间以肉眼或显微镜下可见桔红色斑点为准。
14.用滤纸吸尽染色液后浸入丙*(代"酮")20次。
15.再进入丙*(代"酮")-二甲*混合液(50:50)20次。
16.ZH用二甲*处理并用封固剂封片。
四:
染色细胞培养(是26或6孔培养板培养的细胞,便于在显微镜下观察)
17.小心抽去培养液,注意不要吸走细胞。
18.沿壁上缓慢加入1-2mL自备的1×PBS或HBSS缓冲液,然后再小心将加入的液体吸出。
19.每孔中加入自备的无水乙醇直到全部覆盖细胞,室温放置30分钟后小心移弃无水乙醇,室温晾干。此步用于固定细胞。也可用10%甲醛代替无水乙醇,但固定时间只需要15分钟,同时还需要用蒸馏水洗涤3次才能进入下一步。每次洗涤时,先加入蒸馏水,再浸泡5-10分钟,然后小心吸走蒸馏水。注意:操作时不要破坏细胞单层。
20.每个细胞培养孔中加入1mL 茜素红S染色液,在室温下孵育至少20分钟,ZH小心吸走茜素红S染色液。
21.加入1mL蒸馏水,然后小心吸走蒸馏水。此为洗涤步骤。注意:洗涤一定不要震荡以避免形成的*沉积物脱落。
22.重复上步操作3次(共洗涤4次)。
23.样品可立即用于显微镜检测。有*沉积的细胞将呈现桔红色。
酵母tRNA溶液(精提)北京价格关键词:Yeast tRNA Solution,酵母tRNA溶液(精提),BTN70904B
达旦黄 Carboxypeptidase Y(Yeast) 1829-00-1
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温馨提示:不可用于临床ZL。