北京禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括北京禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M)厂家在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：北京禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M)厂家
规格：48次/盒|96次/盒
等级：科研试剂
编号：SYA320
产地：国产|进口
一、简介：
禽流感病毒实时荧光qRT-PCR检测试剂是按照美国农业部(USDA)的国际检测标准和我国《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004)而制备的商业化检测试剂盒。本试剂盒为中的探针报告基团为6-FAM，淬灭基团为MGB。本方法可定性检测所有亚型禽流感病毒。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种禽类喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液及细胞培养液等。可用于禽流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照国家标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004 )进行样品的采集。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
（1） 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
（2） 每管加入600 µL裂解液，分别加入被检样本200 µL，再加入200 µL*仿，混匀器上振荡混匀5 s，于4℃ 12000 r 离心15 min。
（3） 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，加入-20℃预冷400µL异丙醇，吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中，避免吸出中间层，颠倒混匀。
（4） 于4℃ 12000 r离心15 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体；加入600µL 75％预冷乙醇，洗涤。
（5） 于4℃ 12000 r离心10 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体。
（6） 10000 r离心10 s，用微量加样器将其吸干，室温干燥5 min～10 min。
（7） 加入10µL 无核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r离心5 s，冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000r离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AIV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AIV -PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AIV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AIV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AIV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AIV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


更多有关北京禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M)厂家的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·蜱传出脑炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA240
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·甲型肝炎(HAV)病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA209
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鹅源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号：SYA309
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·单增李斯特氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA004
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中单增李斯特氏菌(Lm)的检测，其检测结果仅供参考。

本试剂盒用一对单增李斯特氏菌特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光PCR技术对单增李斯特氏菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染

者的病原学诊断。本试剂盒中单增李斯特氏菌的探针报告基团为FAM。

试剂盒组成：

 

 

组份	数量	规格
单增李斯特氏菌荧光qPCR反应液(Lm-qPCR MIX)	1 管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(Lm-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤食品样品：样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30-2010)要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的

商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
➤液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm

离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃

恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR

反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。

由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lm-qPCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

 

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴

性对照(NTC)/阳性对照(Lm-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

 

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Lm-PTC)：均产生扩增曲线，且Ct值≤30。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤30的样本为阳性，表明Lm核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Lm核酸阴性。
➤如果30＜Ct值≤35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Lm qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，则判为样本阳性，表明Lm核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


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·人副流感病毒1型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA174
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA544
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·脑脊髓炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA241
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽脑脊髓炎病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用一步法荧光RT-PCR 技术对禽脑脊髓炎病毒RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测脑组织、内脏组织、血液等标本中禽脑脊髓炎病毒(AEV)RNA，用于禽脑脊髓炎病毒(AEV)感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
禽脑脊髓炎荧光qRT-PCR反应液(AEV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AEV-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
病死或扑杀禽的脑部组织2g；待检活禽，用注射器取血5mL 至EDTA-2Na 抗凝管。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。
棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.5g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm 离心2min，取上清液100μL 于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议ZH在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(AEV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AEV-PTC)5μL，10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的ZG点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AEV-PTC)：均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AEV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AEV核酸阴性。
(3) 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AEV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AEV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



北京禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M)厂家关键词：SYA320,禽流感病毒通用型荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(AIV-M),百奥莱博

辅羧酶 Boc-L-Glutamic acid 5-benzylester 154-87-0
9001-51-8 己糖激酶 Hexokinase
磷酸*二*-柠檬酸缓冲液(pH2.2-8.0)   500ml
BTN130422 CM交换介质 CM Medium
BTN120674 酪蛋白 Casein
F040313 猴IgG抗原 Monkey IgG
HC0143 暗盒
HC0118 透析袋夹子
ARB12727 小鼠3-硝基酪*酸(3-NT)酶标法分析 Mouse 3-nitrotyrosine,3-nt ELISA KIT
ARB10377 人甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)elisa检测说明书 Human mannma binding protein/mannan binding lectin,mbp/mbl ELISA KIT
PY01-175  酚红  ind  25克  
ZCPTH02 猪凝血酶 1000ku
70-18-8 L-谷胱甘肽(还原型)/还原型谷胱甘肽
BTN4610 G载体 Magic Vector G
Tris平衡酚(pH＞7.8)   100ml
DN2801 酵母基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
玫瑰红6G Tricyanic acid 989-38-8
BL1310 2×Taq PCR MasterMix(不含染料)
HC0304 Biohit数字瓶口滴定分液器
F040305 猪IgG抗原 Pig IgG
海藻糖无水物 Trilaurin 99-20-7

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