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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京多重PCR扩增试剂盒说明书,产品信息:
类别:核酸扩增(PCR)
英文名:Multiplex PCR Kit
产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
多重PCR扩增试剂盒 | JN0037 | 50μl(100次) |
规格:50μl(100次)
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:JN0037
英文名:Multiplex PCR Kit
本试剂盒针对多重PCR的高产需求及DNA聚合酶的强聚合能力而优化,可在同一个PCR反应体系中,对多个基因使用多对引物同时进行特异性扩增(最多可加入10对引物)。当引物对较多时,可适当添加HotStart Taq DNA 聚合酶和dNTPs以达到良好的扩增效果。
产品用途:常规PCR鉴定、高产量PCR、高通量PCR、多重PCR。
试剂盒组成:
组份 | 体积 |
5×Multiplex PCR Buffer(5U/μl) | 1ml |
HotStart Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 100μl |
dNTPs(10mM) | 250μl |
使用建议:
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加,避免因组分不一导致结果差异;
2、配置和分装反应液时请一定使用新的(无污染的)枪头以避免污染;
3、如扩增条带多,可适当添加酶和dNTPs;
4、当多重 PCR扩增产物的长度均在1 kb以内时,使用 3%~4%浓度的 Agarose gel进行电泳分离效果ZJ。
多重PCR引物设计注意事项:
1、尽量减小各引物间的 Tm 值差;
2、目的片段长度尽量在 1kb以下;
3、引物的长度保持在 22~30bp,GC含量在50~60%为宜,并避免局部区域GC或AT的含量过高;
4、引物应用于多重PCR前要预先对各目的基因进行扩增,以确认引物的特异性及反应性能。
应用实例:
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/4/JN0037.jpg)
图例一)50μl扩增体系中,以50ngλDNA为模板,对长度范围在100-800bp之间的片段的扩增结果。
泳道M:DL2000 DNA Marker;泳道1,泳道2:使用7对不同引物同时扩增的结果
常用反应体系(50μl):
成分 | 体积 |
5×Multiplex PCR Buffer | 10μl |
上游引物*n | 0.2-1.0μM(终浓度) |
下游引物*n | 0.2-1.0μM(终浓度) |
模板 | 50ng |
dNTPs | 1.5μl |
HotStart Taq DNA聚合酶 | 1μl |
ddH2O | 至50μl |
常用PCR循环:
当扩增片段<3K: |
94℃ | 5min |
30次循环 | 94℃,20s 57℃,20秒 72℃,根据产物长度调整,1kb/min |
72℃ | 5min |
4℃ | 保温 |
常见问题及解答:
1、没有扩增产物或量少:保证每一管的引物,buffer,酶等已全部加入;使用高质量的引物,并检测引物是否降解;确认模板的质量及浓度;适度提高缺失(或低产)条带对应的引物用量;确保预混体系已混匀彻底;
2、存在非特异性扩增:检查单对引物的扩增性能与特异性;检查酶用量是否过多,酌情减少酶的用量;降低模板使用量;
3、电泳时条带模糊:检查引物是否出现质量问题,比如降解;减少起始模板量;降低电泳电压,更换新的电泳缓冲液。
储存条件:-20℃
北京多重PCR扩增试剂盒说明书专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:JN0037,多重PCR扩增试剂盒,Multiplex PCR Kit
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温馨提示:不可用于临床ZL。