特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商
英文名:Formaldehyde-acetic acid-ethanol Fixative
编号:BTN160227
品Pai:百奥莱博
规格:250mL
甲醛-乙酸-乙醇(FAA)固定液,又称标准固定液,万能固定液,适用于一般根、茎、叶、花药、子房组织切片,在植物形态解剖研究上应用极广,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜做细胞学研究。此固定液ZD优点是兼有保存剂作用,但对染色体的观察效果较差。
本产品由(38%甲醛)、冰醋酸、70%酒精配制而成。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增。若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。久置时另加入5mL 甘油以防蒸发和材料变硬。本产品固定时间最多10小时。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期为1年。
使用方法:
1.新鲜组织入本固定液浸泡,放4℃冰箱固定。
2.对于组织样品,本固定液必须足量,一般是组织块体积的10-50倍,固定时间视组织块大小而定,一般48-72小时,保证固定液充分渗入组织中。标本浸入组织液后要轻轻摇晃几下,防止标本贴在瓶壁上,影响固定效果。
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北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒
编号:BTN101114
英文名称:Universal Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
规格:50次
本试剂盒可以用于RT-LAMP等温扩增,RT-LAMP即逆转录和Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增RNA。LAMP是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于RT-PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。
产品特点:
1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比RT-PCR更高。
2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的RNA分子
3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增,不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用,包含了除引物和模板RNA外的所有成份,十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
RT-LAMP Mix(2×) | 0.5ml |
AMV-Bst混合液 | 75μl |
对照引物混合物 | 40μl |
对照模板 | 5μl |
MgCl2(25mM) | 0.2ml |
RNase-free水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
注:RT-LAMP Mix(2×)稀释到1×时,已经有8mM Mg2+,本试剂盒提供的MgCl2(25mM)用于用户优化条件用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:1.在冰上溶解除酶外的各种组份,混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:
成份 | 样品管 | 阴性对照 |
RT-LAMP Mix(2×) | 10μl | 10μl |
自备FIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
自备BIP引物终浓度 | 0.8μM | 0.8μM |
自备F3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
自备B3引物终浓度 | 0.2μM | 0.2μM |
自备Loop F引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
自备Loop B引物终浓度(可选项) | 0.4μM | 0.4μM |
自备模板 RNA | 1-100ng | 不加 |
AMV-Bst 混合液 | 1.5μl | 1.5μl |
补水到 | 20μl | 20μl |
注:如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL),则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀,置于60-65℃保温30-120分钟。注意:如果不使用Loop引物,则保温120分钟;如果使用Loop引物,则保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。此酶有外切酶活性,所以必须灭活。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特征性电泳图谱;
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
c)荧光定量检测。
5. 结果分析:
a)如果没有扩增,则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供阳性对照,反应按下表设置:
成份 | 阳性对照管 |
RT-LAMP Mix(2×) | 10μl |
对照引物混合物 | 4.0μl |
对照模板 | 1μl |
AMV-Bst 混合液 | 1.5μl |
水 | 3.5μl |
混匀后,置于60℃保温120分钟,其余操作同上。注意:本对照引物中没有Loop引物,所以保温120分钟。
b)如果阳性对照能够扩增出,则说明试剂盒没有问题,可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带,则是试剂盒的问题,请跟厂家联系。
注意事项:1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外,尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP,加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起,配制成10.浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此,必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染,所有相关试剂必须全部更换,必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因,可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床ZL、食品等用途。
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·DNA marker(pBR322/MspI)
编号:BTN90602B
英文名称:DNA ladder(pBR322/MspI)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
·动态浊度法内毒素定量试剂盒
编号:BTN131204
英文名称:Eendotoxin Quantification Kit(Dynamic turbidity method)
规格:1.7×10支
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C 因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成,反应液的吸光度(OD值,浊度)增加,OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之,OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关,启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系,据此,可以定量供试品的内毒素浓度。本试剂盒的检测限为0.01 EU/mL~10 EU/mL。
储存条件:低温运输,低温运输,4℃避光保存,有效期两年。
自备试剂:细菌内毒素标准品(BTN140405)、无内毒素水(BTN130502)(可从本公司另购)
使用方法:一、设备准备除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。
旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。
带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件,例如,微板鲎试仪ELx808及软件TALgent或Gen5。
二、实验操作1.动态光度测定仪器的设定,以微板鲎试仪ELx808为例:
a)预热仪器,设置温育温度为37ºC。
b)设置模板及程序:设定读板波长为630nm,设定动力学参数:读板120分钟,每30秒读一次。
2.内毒素标准溶液配制:
a)标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5,0.25,0.125,0.0625 EU/mL或10,1,0.1,0.01 EU/mL)。
b)取自备的细菌内毒素标准品1支,用砂轮沿安瓿颈部划痕,开启,加入适量(建议在0.5mL- 1.2mL之间)自备的无内毒素水,置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。
c)将上述内毒素溶液进一步用自备的无内毒素水稀释成所需浓度,每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。(稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟,放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。)
3. 阴性对照为无内毒素水。
4. 鲎试剂的溶解:按标示量加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器,将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽,并轻轻摇匀。
5.在微板鲎试仪ELx808上操作:
a)取除热原微板,在各孔中分别加入100μl无内毒素水、内毒素标准溶液,或供试品。
b)将微板放置于鲎试仪中,37ºC温育10分钟。
c)温育结束后,用移液器或多道移液器加入100μl鲎试剂(避免产生气泡),中速振摇10秒混匀,在630nm波长处,每30-60秒读一次,读板120分钟。
三、数据处理设定启动OD(可以设为0.02,一般可以在0.02到0.04之间),软件自动给出其启动时间(T)。
建立标准曲线:lgT = b lgC + a,其中T为启动时间,C为内毒素的浓度,b为直线斜率,a为Y轴截距。
当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效:
a)标准曲线的浓度点≥4,标准曲线的相关系数r≤-0.980。
b)标准曲线ZD点的T值小于阴性对照的T值。
c)供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。
注意事项:1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测,严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。
3. 供试品的pH值应在6.0–8.0之间,若超出此范围,需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
4. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验,参见供试品的干扰试验。
供试品的干扰试验:1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时,必须进行干扰试验;
2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变,或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时,必须重新进行干扰试验;
3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验。
步骤如下:1. 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm),作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度,如采用标准曲线为10,1,0.1,0.01 EU/mL系列时,可以用供试品配制0.1 EU/mL内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。
2. 用供试品溶液配制浓度为λm的内毒素溶液(即含λm内毒素的供试品阳性对照),测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs;
3. 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度,称为Ct;
4. 计算该试验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm×100%;
5. 当R在50%~200%之间,则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用;
6. 当R在50%~200%之外,需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤2-4,直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。
北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商关键词:FAA,Formaldehyde-acetic acid-ethanol Fixative,BTN160227,甲醛-乙酸-乙醇固定液,甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)
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·Bsu DNA聚合酶,大片段
编号:BTN130616
英文名称:Bsu DNA Polymerase,Large Fragment
规格:200U
Bsu DNA聚合酶大片段保留了Bacillus subtilis DNA聚合酶I的5´→3´聚合酶活性,但是缺失了5´→3´外切酶结构域。大片段缺乏3´→5´外切酶活性。
产品用途:1.DNA等温扩增;
2.引物延伸;
3.80℃ 20分钟即可失活;
4.建议反应温度不要超过70℃,不能用于热循环测序或PCR。
产品组成: 成分 | 规格 |
Bsu DNA聚合酶,大片段,5000U/mL | 0.04ml |
反应Buffer,10× | 1.25ml |
说明书 | 1份 |
活性单位定义:1单位指37℃条件下,30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
储存Buffer:25mM Tris-HCl(pH7.4),50mM NaCl,1mM DTT,0.1mM EDTA,50% Glycerol。
反应条件:1×Buffer[10mM Tris-HCl,50mM NaCl,10mM MgCl2,1mM DTT(pH7.9 @ 25℃)]。加入33μm dNTPs(不随酶提供),37℃孵育。
灭活:75℃ 20分钟。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
备注:
1.由于缺乏3´→5´核酸外切酶活性,Bsu DNA聚合酶大片段不能切除3´未配对的突出末端,因而不适用于生成平滑末端;
2.25℃时,Bsu DNA聚合酶,大片段保留50%的活性,是同温度下Klenow片段(3´→5´exo–)的两倍。
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商。
温馨提示:不可用于临床ZL。