Protein A琼脂糖凝胶 蛋白质研究

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Protein A琼脂糖凝胶 蛋白质研究在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Protein A琼脂糖凝胶
编号：WE0271
产地：国产|进口
规格：5ml
品Pai：百奥莱博
  本产品可从血清，腹水，细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性，高流速，低Protein A-Agarose脱落等特点。

注意事项：
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱，避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1，长径比过大将导致洗脱峰拖尾，洗脱体积增大；长径比过小将导致样品与填料接触时间短，吸附不充分，填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高，应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml，抗体浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短，洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性，以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后，应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右)，以利于维持抗体的生物活性，避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理，长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。

使用方法：

I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液：纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的，部分参照如下。

 

抗体	平衡缓冲液成分
人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b	20 mM PBS，300 mM NaCl，pH7.4-8.5
人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3	50 mM Tris-Cl，3 M NaCl，pH7.8-8.5

2、洗脱缓冲液：0.1 M柠檬酸*缓冲液，pH4.0。
3、再生缓冲液：1 M NaCl。
4、中和缓冲液：1 M Tris-Cl，pH9.0。
注意：
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。

II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰，去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意：样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。

III 操作步骤
1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱，室温静置10分钟，待凝胶与溶液分层后，把底部的出液口打开，让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净，用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱，上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。
注意：收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中，ZH根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积，再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积，再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2～8℃保存。

储存条件：2～8℃，避免冷冻
关键词：Protein A琼脂糖凝胶,WE0271,Protein A-Agarose


Protein A琼脂糖凝胶 蛋白质研究极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

 

编号	名称
WE0374	罗丹明山羊抗大鼠IgG(H+L)
WE0142	快速实时荧光定量PCR预混体系(低含量ROX校正染料)
WE0209	磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒
WE0180	粪便基因组DNA提取试剂盒
WE0123	GX热启动DNA聚合酶
WE0200	植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
WE0331	抗GST标签琼脂糖介质
WE0292	Western中分子量蛋白Marker
WE0343	抗V5标签单克隆抗体
WE0350	抗HA标签多克隆抗体
WE0321	一抗稀释液(WB IHC)
WE0281	蛋白银染试剂盒
WE0246	2kb DNA Marker
WE0320	封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)
WE0341	HRP标记抗His标签多克隆抗体
WE0251	TOP10感受态细胞
WE0116	2×富含GC PCR MasterMix
WE0273	微量BCA蛋白定量试剂盒
WE0272	Ni琼脂糖凝胶
WE0134	SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)
WE0101	Taq DNA Polymerase
WE0141	快速实时荧光定量PCR预混体系
WE0392	FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0245	1kb DNA Ladder
WE0170	DNA产物快速纯化试剂盒
WE0213	DNase I(不含RNase)
WE0113	BaHF高保真DNA聚合酶
WE0376	HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)
WE0274	蛋白标准溶液BSA
WE0243	Super DNA Ladder
WE0286	SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
WE0205	磁珠法DNA纯化回收试剂
WE0381	Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)
WE0357	抗GAPDH多克隆抗体
WE0215	5×TBE
WE0206	磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
WE0172	新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
WE0380	山羊抗兔IgG(H+L)
WE0390	AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0185	血块基因组DNA提取试剂盒