DNA Marker I plus(100～700bp)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")DNA Marker I plus(100～700bp)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：DNA Marker I plus(100～700bp)厂家
产地：国产|进口
编号：RFT017
品Pai：百奥莱博
规格：100T(2×250μl)
本产品是由7条带状双链DNA条带组成的DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带大小和含量分别为100bp(60ng/5μl)，200bp(50ng/μl)，300bp(30ng/μl)，400bp(40ng/μl)，500bp(50ng/μl)，600bp(50ng/μl)，700bp(70ng/μl)。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的精确定量。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl；窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为2.0-2.5％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

DNA Marker I plus(100～700bp)厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·DNA Marker IV(500～7000bp)
编号：RFT021
规格：100T(2×250μl)
本产品是由6条JZ定量的带状双链DNA条带组成DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的定量分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。6条带大小包括500bp，1000bp，1500bp，3000bp，5000bp，8000bp，其中3000bp条带最亮，含量为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)就行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·Western二抗稀释液
编号：RFT085
英文名称：Secondary Antibody Dilution Buffer
规格：100ml
本品可以用于Western时二抗的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。按照每个二抗稀释10毫升计算，一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。

使用方法：
参考所用的二抗的使用说明，以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量，按照适当比例例如1:1000、1:500等比例稀释二抗。二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后，可以回收稀释的二抗，4℃保存，以用于下次的Western，通常在1-2周内可以重复使用3-5次。

注意事项：
本Western二抗稀释液经过滤CJ处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完，如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

储存条件：2～8℃，有效期一年。


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·10×BalbBlot快速转膜液
编号：RFT081
英文名称：10×BalbBlot Rapid Transfer buffer
规格：500ml
本快速转膜液使用独特配方，能GX快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法，能在15-35分钟内完成转膜过程。

产品特点：
1、快速和环保：快速转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。
2、兼容性好：快速转膜液能兼容Laemmli胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
3、转移效率高：快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率，有效解决了大小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。

使用方法：
转膜前的准备：
5-6张裁好的滤纸；裁好的转印膜；足够的1×快速转移buffer

一、湿转法(Tank blot)：
1、按照下表配制1×快速转膜液

 

	1×快速转膜液配制量
	100 ml	500 ml	1000 ml
10×快速转膜液	10 ml	50 ml	100 ml
无水乙醇	20 ml	100 ml	200 ml
超纯水	70 ml	350 ml	700 ml

2、将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中，完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意：水中漂洗时间一定不能超过2分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4、按照以下顺序做好转印三明治结构：
—>负极(阴极)
—>一块海绵
—>2mm滤纸
—>凝胶
—>转印膜
—>1mm滤纸
—>一块海绵(根据三明治的厚度选择是否使用)
—>正极(阳极)

注意：
a.要彻底清除三明治结构中的气泡，适当补加1×快速转膜液保持三明治结构湿润。
b.PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。
c.三明治结构的制作不能太紧，也不能太松。太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧的话，可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
5、将三明治结构放于转移槽中。
注：转移槽中可以不用1×快速转膜液，可以用1×TGS(Tris-Glycine-SDS)电泳缓冲液取代。三明治结构中的快速转膜液足够保证转膜的完成。

二、半干转(Semi-dry blot)：
1、按照下表配制1×快速转膜液：

	1×快速转膜液配制量
	100 ml	500 ml	1000 ml
10×快速转膜液	10 ml	50 ml	100 ml
无水乙醇	20 ml	100 ml	200 ml
超纯水	70 ml	350 ml	700 ml

2、将滤纸浸泡在1×快速转膜液中，完全浸湿。
3、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS；随后将凝胶浸泡在1×快速转膜液中。
注意：水中漂洗时间一定不能超过2分钟，否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
4、按照以下顺序做好转印三明治结构：
—>负极(阴极)
—>下层滤纸
—>凝胶
—>转印膜
—>上层滤纸
—>正极(阳极)

半干转时，滤纸、胶、膜之间的大小，一般是下层滤纸>=膜>=胶>=上层滤纸。上下两层的滤纸一定不能接触；滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
注意：PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒。

三、转移条件：
推荐使用恒流转移

电流	转移时间
300 mA	30 to 35 min
330 mA	25 to 30 min
350 mA	25 to 30 min
375 mA	20 to 25 min
400 mA	15 to 20 min

储存条件：18～25℃，有效期1年。


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