提供商:
武汉爱基百客生物科技有限公司
服务名称:
LncRNA测序
规格:
单个样品
LncRNA测序及信息分析简介 lncRNA(long non-coding RNA)是一类长度超过 200nt 的长链非编码 RNA,通过与 DNA、RNA或蛋白质结合,在表观遗传、转录及转录后等水平调控基因表达。其中常见的,具有调控作用的非编码 RNA 包括 miRNA、piRNA以及长链非编码 RNA。研究者的大量研究表明非编码 RNA 在表观遗传学的调控中扮演了越来越重要的角色。技术原理 采用特定方法(如采用Ribo-Zero TM系列Kit)降低样本中 rRNA 的丰度,对富集到的 RNA 进行文库构建。通过高通量测序仪产出数据,并结合生物信息分析软件,将构建出的转录本与已知 lncRNA 数据库进行比对,筛选出已知 lncRNA;将未比对上转录本与已知蛋白数据库比对进而去除比对上的序列,然后进行CPC(Coding Potential Calculator)预测新 lncRNA,并基于二级结构的保守性对 lncRNA 进行家族分类。ZH,对预测的新 lncRNA 和已知 lncRNA 进行功能分析,从而快速全面准确地获得与特定生物学过程(例如发育、疾病等)相关的 lncRNA 信息。技术优势 1. 基于高通量测序技术,一次性可以全面获得样本中lncRNA信息; 2. 不局限于对已知lncRNA的研究,还可进行novel lncRNA预测、功能注释等; 3. 技术稳定,建库重复性好,同一样本重复建库相关性好。
技术路线
分析流程
样品要求1. 样品类型:细胞、新鲜组织或 RNA 样品。2. 样品量:细胞样品请提供至少1×107个细胞,组织样品请提供至少300 mg的组织块或切片,RNA样品请提供10 μg以上的总 RNA。3. 样品质量:RNA 无明显降解,提取的总RNA OD260/280值在1.8-2.2之间,浓度≥500ng/μL,28S:18S≥1.5,Rin≥74. 样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成短波浪号~50 mg的小块)可用 TRIZOL 或 RNA 保护剂处理或液氮冻存后,-80℃保存。RNA 样品可溶于乙醇或RNA- free的超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。5. 样品运输:样品置于1.5mL管中,Parafilm 膜封好,干冰运输。http://www.igenebook.com
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爱基百客——LncRNA测序及信息分析.pdf
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