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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)厂家现货,产品信息:
类别:探针标记及检测
英文名:Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法) | YT031 | 10次 |
产地:国产|进口
英文名:Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
品Pai:百奥莱博
编号:YT031
本试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。
在Klenow酶(Klenow fragment,3"-5"exo-)催化下,通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中,这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中,一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下,通过随机引物标记反应,ZH可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针,可多达1-15倍左右。
本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记,包括DNA片段、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DNA片段应不小于100bp,小于100bp的DNA模板可以使用百奥莱博的生物素3"末端DNA标记试剂盒(YT030)进行DNA探针标记。
用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng,推荐的模板用量为100ng-1μg。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA,可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。生物素标记DNA可以使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当试剂盒进行检测。本试剂盒可以用于10个标记反应。
试剂盒组分:
Random Primer in Buffer(5X) | 105μl |
Klenow Fragment | 11μl |
Biotin-Labeling Mix | 50μl |
Ultrapure Water | 1ml |
Biotin-Control DNA(3ng/μl) | 50μl |
探针标记终止液 | 100μl |
储存条件:-20℃。
使用说明:
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板,再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water,至总体积为34μl。(通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应)
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X),混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟,或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃,99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment,混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量,因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液,混匀,终止标记反应。至此标记反应已经全部完成,标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。
10. 整个探针标记反应的流程参见下表:
100ng-1μgDNA模板 | xμl |
Ultrapure Water | (34-x)μl |
Random Primer in Buffer (5X) | 10μl |
100℃ 5分钟,立即冰浴冷却 |
Biotin-Labeling Mix | 5μl |
Klenow Fragment | 1μl |
总体积 | 50μl |
37℃孵育过夜 |
探针标记终止液 | 3μl |
-20℃保存 |
此时可用于标记效率的检测及Southern、Northern等后续检测 |
11. 探针标记效率的检测:可以对标记好的探针进行适当梯度稀释后,使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当的方法进行检测。通常探针的标记效率可以参考下表:
模板DNA量 | 生物素标记DNA产量 |
— | 孵育1小时 | 孵育20小时 |
10ng | 80ng | 900ng |
30ng | 150ng | 1350ng |
100ng | 350ng | 1650ng |
300ng | 750ng | 2200ng |
1000ng | 1300ng | 2600ng |
3000ng | 1600ng | 2600ng |
注意:具体的探针标记效率还和模板DNA的长度、纯度等因素有关,上表的数值仅供参考。
12. 使用本试剂盒所获得的生物素标记DNA的长度通常在数百bp左右。具体的长度因模板的长度而有所不同。例如模板DNA的长度为1kb,则生物素标记DNA产物的长度通常为100-1000bp,平均长度约为300bp左右。
YT031型生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)厂家现货专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法),YT031,Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
我公司依托国内外技术研发人才的优势,公司的销*(代"售")额保持高速增长,企业规模不断扩大,拥有专业的技术研发团队,长期致力于ELISA试剂盒、生物试剂(包括)的研发,为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。
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编号 | 类别 | 名称 |
YT093 | 免疫检测 | Kisser封片液(不含*酚) |
YT388 | 核酸扩增(PCR) | dTTP溶液(100mM) |
YT866 | 二抗 | Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L) |
YT473 | 克隆与表达 | N端BFP标签融合蛋白质粒(蓝色荧光蛋白) |
YT319 | YZ剂激活剂 | NF-κBYZ剂(BAY 11-7082) |
YT661 | 一抗 | 磷酸化CENP-A(Ser7位点)抗体 |
YT681 | 一抗 | 小鼠抗AU1标签抗体 |
YT529 | 其他分子生物学试剂 | RNA寡核苷酸退火缓冲液 |
YT024 | 其他细胞生物学试剂 | BL21甘油菌 |
YT328 | YZ剂激活剂 | *离子载体(Ionomycin,5mM) |
YT288 | 生化检测试剂盒 | 一氧化*(代"氮")合成酶检测试剂盒(荧光法) |
YT810 | 一抗 | IRE1α抗体 |
YT687 | 一抗 | 小鼠抗β-Catenin抗体 |
YT601 | 酶和辅酶 | 海因消旋酶 |
YT043 | 蛋白质研究 | 细胞线粒体纯化试剂盒 |
YT580 | 酶和辅酶 | 麦芽寡糖基海藻糖水解酶 |
YT078 | 免疫检测 | BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒 |
YT087 | 免疫检测 | 免疫染色封闭液 |
YT184 | 蛋白质研究 | 红细胞裂解液 |
YT117 | 免疫检测 | FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 |
YT667 | 一抗 | Cyclin D3抗体 |
YT612 | 蛋白质研究 | RIPA裂解液(强中弱套装) |
YT379 | 核酸扩增(PCR) | PCR试剂盒(含Taq酶,Buffer,dNTP,上样液) |
YT858 | 二抗 | Alexa Fluor 488标记山羊抗兔IgG(H+L) |
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温馨提示:不可用于临床ZL。