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名称:北京腔肠素hcp大量库存促销
英文名:Coelenterazine hcp
编号:SY0239
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
本品为粉末形式供应的腔肠素hcp(Coelenterazine hcp),是天然腔肠素的衍生物之一。腔肠素hcp-水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍,且量子产量高和Ca2+反应速度快。非常适合用于*离子水平的检测。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
英文别名:CLZN-hcp
CAS:123437-32-1
分子式:C25H25N3O2
分子量:399.48 g/mol
溶解性:溶于甲醇或者乙醇,不可溶于DMSO
外观:黄色至橘色粉末
纯度:≥95%(TLC)
结构:
注意事项
1)腔肠素hcp粉末使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,可能造成腔肠素hcp氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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·CCCP(50mM) 细胞凋亡诱导剂
编号:SY0485
规格:100μl
本品是溶于DMSO的CCCP溶液,浓度为50mM,体积为100μl(相当于1mg的总量),常用作一种阳性对照来诱导细胞凋亡,并配合线粒体膜电位检测探针JC-1(货号SY0488)或者JC-10(货号SY0490)来进行相关研究。
CCCP,即Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone,一种质子载体(H+ ionophore),是一种的线粒体氧化磷酸化解偶联剂,促使线粒体内膜对H+产生通透性,导致线粒体内膜两侧的膜电位丧失,诱导凋亡发生。也可作用于叶绿体膜,YZ光合作用;CCCP还可YZ内质网-高尔基体(ER-Golgi)之间的蛋白转运,高亲和力结合细胞色素C氧化酶。
CCCP还具有其他功能:
1)在牛蛙交感神经方面的实验表明,CCCP 可增强促黄体生成素释放激素的释放;
2)作为一种质子导体在葡萄糖存在的情况下影响E.coli 细胞活性;
3)对细胞内*水平的各种调节效应;
4)YZ脂肝酶的分泌;
5)部分YZpH梯度活化的Cl-摄取以及刷状缘膜的Cl-/Cl-交换等。
英文别名:Carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone; m-Cl-CCP; Mesoxalonitrile 3-chlorophenylhydrazone;(3-Chlorophenyl)hydrazonomalononitrile
CAS:555-60-2
分子式:C9H5ClN4
分子量:204.62
纯度:≥97% (TLC)
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
·HNF4-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0080
英文名称:HNF4 luciferase reporter plasmid
规格:1μg
HNF4荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(HNF4 luciferase reporter plasimd)是用于检测HNF4转录活性水平为目的的报告基因。HNF4(Hepatocyte Nuclear Factor 4)是转录因子核受体超家族中的一员,参与肝细胞分化调控和维持肝细胞的生物学功能。HNF4α主要在消化系统、肝脏和肾脏表达,以及在白色脂肪组织和中也有少量的表达。HNF4α具有阻断肝纤维化、肝硬化、肝癌的疾病进程,改善肝脏功能的作用。另外,HNF4α在肝干细胞移植方面也发挥重要作用,提高肝细胞移植的成功率。
HNF4报告基因主要用于检测细胞中HNF4的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMHNF4-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个HNF4结合位点,可以高灵敏度地检测HNF4的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得HNF4报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMHNF4-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
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温馨提示:不可用于临床ZL。