特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖二甲基腔肠素库存在内的细胞生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:二甲基腔肠素库存
品Pai:百奥莱博
英文名:Coelenterazine 2-methyl
产地:国产|进口
规格:1×50μg
编号:SY0242
本品为粉末形式供应的二甲基腔肠素,系天然腔肠素衍生物,具有无毒、细胞膜通透性等特性,是一种细胞强抗氧化剂,可GX作用于细胞内的活性氧,如单态氧和超氧阴离子。由于氧化应激是细胞凋亡过程的中介环节,因此,二甲基腔肠素可能作为一种研究细胞凋亡的重要工具。另,二甲基腔肠素还可通过化学发光法来检测超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子水平。
腔肠素(Coelenterazine)是自然界中资源最丰富的天然荧光素,是绝大多数海洋发光生物(超过75%)的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物,比如海肾荧光素酶(Rluc),Gaussia分泌型荧光素酶(Gluc),以及包括水母发光蛋白(aequorin)和薮枝螅发光蛋白(Obelia)在内的光蛋白(Photoproteins)。其发光原理是:以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下,氧化腔肠素,产生高能量的中间产物,并在此过程中发射蓝色光,峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫(或萤火虫)荧光素/荧光素酶系统不同,腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷(ATP),因此更便于体内生物荧光的研究。因此,腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。
腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光,细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号,因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧(ROS)水平。
腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET),利用此特性,当与荧光蛋白如GFP的突变体(增强的黄色荧光蛋白,EYFP)联合使用,在底物腔肠素存在的情况下,荧光素酶(如Rluc)催化底物发生蓝光,能量随之转移到EYFP上,发出绿光(~530nm)。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估,适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外,由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定,消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量,适用于高通量筛选如药物开发。
更为重要的一个功能,水母发光蛋白复合物(Aequorin)由22kDa的水母蛋白(Apoaequorin protein)、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子(Ca2+)与该复合物结合后,腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide,同时释放出CO2和蓝色荧光(~466 nm)。正是此Ca2+依赖性的反应过程(见图1),使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比,其主要具有以下几个优点:
1)能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM;
2)样品无自体荧光,背景荧光低于使用荧光*离子指示剂;虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱,但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比,因此具有更高的灵敏度。
3)水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内,使其能够进行数小时至数天的*离子监测。
图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程
目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素(Coelenterazine native),另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验,但是由于其发光波长,细胞膜渗透性,光量子效率上的差异,使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。
英文别名:Coelenterazine, 2-methyl analog; Methyl Coelenterazine; 2-methyl Coelenterazine
CAS:N/A
分子式:C20H17N3O2
分子量:331.37
溶解性:溶于甲醇或乙醇
外观:黄色粉末
纯度:>98%(TLC)
结构:
注意事项
1)二甲基腔肠素粉末使用惰性气体-氮气或氩气,在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入,也可能造成二甲基腔肠素氧化失活,使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
想要了解更多关于二甲基腔肠素库存的价格、品Pai、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·通用型Western Blot电泳电转缓冲液
编号:SY0360
英文名称:Universal Electrophoresis and Transfer Buffer (for Western Blot)
规格:1L
Western blot实验首先需要进行电泳分离目的蛋白,然后将分开的蛋白从凝胶转移到固相基质如硝化纤维素膜或PVDF膜上,从而进行随后的免疫印迹检测。Tris-甘*酸是最通用的电泳和转膜缓冲液配方,本品是改进的缓冲液配方,以干粉的形式提供,使用时只需要用去离子水溶解即可。
使用方法:将本品溶解于1 L去离子水中,混匀,即形成1×电泳缓冲液;取800 ml的1×电泳缓冲液加入200 ml乙醇即得到湿转及半干通用电转缓冲液。
注意事项
不建议反复使用或长期放置缓冲液,否则会降低电泳及转膜效果。
储存条件:室温密封
·正钒酸*
编号:SY0331
英文名称:Sodium Orthovanada
规格:10g
正钒酸*英文名称为Sodium orthovanada, 是一种常用的竞争性磷酸酶YZ剂,可以YZ碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP),酸性磷酸酶(acid phosphatase),酪*酸磷酸酶(tyrosine phosphatase, TP)等,也可以YZNa+/K+ATPase等ATPase。常用于YZ蛋白去磷酸化或促进蛋白的磷酸化激活,在提取细胞或组织蛋白时常用于保持蛋白的磷酸化状态。在加入EDTA或经稀释后,正反酸*的YZ表现可逆性。
正钒酸*使用前需要先被充分活化(去聚合)以获得ZD的磷酸酶YZ活性。本产品以粉末形式提供,对其活化(去聚合)后方可使用。我司另有以活化正钒酸*供应【Cat#SY0322】,常见使用浓度范围为1~10 mM。
中文别名:原钒酸*
英文别名:Sodium vanadate
CAS:13721-39-6
分子式:Na3VO4
分子量:183.91
纯度:>96%
外观:白色至类白色粉末
溶解性:易溶于水,不溶于乙醇
外观:灰白色至白色结晶
储存条件:室温
溶解与使用
使用前,正钒酸*需要先被充分活化(去聚合)以获得ZD的磷酸酶YZ活性,步骤如下:
1)正钒酸*溶于水配制200 mM的溶液,称取适量正钒酸*粉末溶于纯水中。
2)用1N NaOH或1N HCl调整pH至10.0。正钒酸*起始溶液的pH值依批次变化而有差异。pH 10.0溶液呈现黄色。
3)加热煮沸,直至溶液变为无色(大概煮10 min),所有的结晶必须充分溶解。
4)冷却至室温。
5)重新调整pH至10.0,并重复步骤3)4)直至溶液保持无色且pH稳定在10.0。
6) 将活化的正钒酸*溶液分装成小份(如1 ml),-20 ℃保存。储存液可直接加入细胞或组织裂解液,稀释到工作液如1 mM。细胞培养实验需要先用0.2 um滤膜过滤CJ后,稀释加入培养基内;
7)从-20 ℃取出分装小样融化后,需加热溶液约至90~100 ℃,漩涡混匀,充分溶解结晶。
二甲基腔肠素库存关键词:二甲基腔肠素, 2-methyl Coelenterazine,Coelenterazine, 2-methyl analog, Methyl Coelenterazine
叶绿素铜*盐 4′-Chloroacetanilide 11006-34-1
三羟甲基*基甲*(代"烷")乙酸盐 Neodymium(III) chloride 6850-28-8
BTN130535 APMSF溶液 APMSF Solution
ARB13755 骆驼内皮素1(ET-1)酶免分析 Camel endothelin 1,et-1 ELISA KIT
CYB164020 羊抗大鼠IgG(1:500~2000)-HRP
ARB11335 human胎盘泌乳素(PL)ELISA检测服务 Human placetal lactogen,pl ELISA KIT
F050304 山羊IgG抗体 Goat IgG
ARB10246 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)Elisa分析 Human hepatitis b virus,hbv pres2ag ELISA KIT
ARB10084 人CXC趋化因子受体1(CXCR1)含量分析 Human cxc-chemokine receptor 1,cxcr1 ELISA KIT
5,5-二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲*(代"酸") Non-fat Powdered Milk 69-78-3
ARB13551 兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)免费代测 Rabbit β-thromboglobulin,β-tg ELISA KIT
ARB12753 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA代测服务 Mouse cxc-chemokine receptor 3,cxcr3 ELISA KIT
D0101 脱纤维新生牛血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
二甲基腔肠素库存关键词:二甲基腔肠素, 2-methyl Coelenterazine,Coelenterazine, 2-methyl analog, Methyl Coelenterazine
·2×Long PCR Master Mix(不含染料)
编号:SY0032
英文名称:2×Long PCR Master Mix (No Dye)
规格:1ml
Long PCR Master Mix (No Dye)包含Long Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3"→5’外切酶活性(校对活性)的蛋白组成的混合酶,保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。配合独特的缓冲体系,Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。
Mix中不含有*酚蓝染料,其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50 μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增dystrophin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 Kb条带。
操作注意事项
由于Long Taq DNA Polymerase在室温下也有一定的反应活性,建议在冰上配制PCR反应体系,再置于PCR仪上进行扩增。这样有利于提高扩增的特异性,减少非特异扩增,得到良好的PCR结果。
引物设计注意事项
1)引物3’端ZH一个碱基为G或者C;
2)引物3’端ZH8个碱基应避免出现连续错配;
3)引物3’端尽量避免发夹结构出现;
4)引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5)引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6)引物的GC含量控制在40%-60%之间;
7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
北京百莱博科技有限公司是报告基因检测产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购二甲基腔肠素库存。
温馨提示:不可用于临床ZL。