北京现货耐热逆转录酶II库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货耐热逆转录酶II库存在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：耐热逆转录酶II
英文名：Reverse Transcriptase II
编号：SY0294
产地：国产|进口
品Pai：百奥莱博
规格：2000U
Reverse Transcriptase（第二代耐热逆转录酶）是Reverse Transcriptase（DY代耐热逆转录）的升级产品，是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上通过体外分子进化技术获得的全新耐热逆转录酶。与上一代相比，进一步大幅提高了热稳定性，50℃下半衰期超过240min，并长时间耐受55℃高温且保持稳定，非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。此外，增加了多个突变位点，进一步增强了模板亲和力和行进性，大幅提升全长cDNA的合成能力，可获得长达20 kb的cDNA。另外，对于常见的逆转录YZ物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

活性定义：以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物，在37℃，10min内，掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测：200 U本品和1 μg小鼠肝脏总RNA在37 ºC下孵育1h，RNA电泳谱带不发生变化。
功能检测1：逆转录体系中加入200 U本品，以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，50 ºC反应30min。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测2：逆转录体系中加入200 U本品，以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，55 ºC反应45min。取10% cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测3：逆转录体系中加入200 U本品，以1 pg-1 μg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23VN和Random Hexamers为引物，测试qRT-PCR 性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

准备工作
1. 防止RNase污染：请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free。
2. 引物选择：
2.1 后续实验为PCR
a, 如果模板为真核生物来源，一般情况下Oligo dT18，与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得ZG产量的全长cDNA。
b, 基因特异性引物 (GSP)的特异性ZG。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导DY链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
c, Random hexamers特异性ZD，所有RNA，包括mRNA, rRNA, tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。
2.2 后续实验为qPCR
a, 将Oligo dT18与Random hexamers混合使用，可使mRNA的各个区域均能以相同效率引发cDNA合成，有助于提高定量结果的重复性。
关键词：耐热逆转录酶II,Reverse Transcriptase II,SY0294


关于北京现货耐热逆转录酶II库存的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

编号	名称
SY0510	细胞增殖示踪荧光探针
SY0594	溶酶体黄/蓝色荧光探针
SY0117	AP3-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0155	STAT3-GFP报告基因质粒
SY0280	多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
SY0453	牛血清白蛋白(无DNase、蛋白酶、IgG)
SY0488	JC-1荧光探针
SY0500	Hoechst 33342/PI双染试剂盒
SY0176	GLI-GFP报告基因质粒
SY0193	GAL4-GFP报告基因质粒
SY0436	人β-淀粉样多肽 1-42
SY0032	2×Long PCR Master Mix(不含染料)
SY0719	碱性磷酸酶标记驴抗小鼠IgG (H+L)
SY0633	兔抗β-肌动蛋白多克隆抗体
SY0219	LXR-GFP报告基因质粒
SY0078	HIF-1-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0053	胞苷三磷酸溶液(100 mM)(CTP)
SY0390	牛纤维蛋白原
SY0736	Alexa Fluor 488标记驴抗大鼠IgG(H+L)
SY0166	MTF1-GFP报告基因质粒
SY0047	dNTP混合溶液(10 mM each)
SY0533	淋巴细胞分离液1.084
SY0197	SRE-GFP报告基因质粒
SY0162	PR-GFP报告基因质粒
SY0392	His标签蛋白琼脂糖纯化树脂
SY0388	小牛肠碱性磷酸酶
SY0727	Alexa Fluor 594标记驴抗兔IgG(H+L)
SY0357	4×Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8
SY0246	荧光定量PCR核酸染料(20×)
SY0659	HRP标记小鼠抗GST-tag单克隆抗体
SY0100	TCF/LEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0434	Anti-V5标签亲和纯化凝胶
SY0259	双链DNA(dsDNA)定量试剂
SY0703	R-藻红蛋白标记山羊抗大鼠IgG(H+L)F(ab)2片段
SY0323	蛋白酶YZ剂Cocktail，EDTA-free，迷你型，片剂