琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品Pai
产地:国产|进口
规格:100T/400T
编号:XH014
品Pai:百奥莱博
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA片段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
更多有关琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品Pai的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·SABC(兔IgG)-FITC免疫组化试剂盒
编号:XH113
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化羊抗兔:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, 稀释液:30ml。
5, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品Pai关键词:琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014,百奥莱博
·真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)
编号:XH007
规格:50T/200T
原理简介
真菌是具有真核和细胞壁的异养生物。种属很多,已报道的属达1万以上,种超过10万个。真菌通常又分为三类,即酵母菌、霉菌和蕈菌(大型真菌)。对于酵母菌和霉菌,可以用玻璃珠处理,而对于大型真菌,可直接用液液氮研磨。经过前期处理的菌液,再经过裂解液及蛋白酶处理后,玻璃奶吸附DNA,去掉其他杂质,,可得到高纯度的基因组。提取纯化后的DNA,可以直接用于 PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.由于真菌种类万千,对于一些特别难处理的真菌,可用液氮研磨,再用玻璃珠振荡,蛋白酶K处理,一般都可以得到一定量的基因组DNA,如电泳检测很弱,一般PCR都会有较好结果。
2.如果DNA提取量很少,可加长玻璃珠处理时间,如果提取DNA片段很短,成弥散条带,可减少玻璃珠处理时间。
操作步骤
1.样品的处理:
1)对于酵母菌,取1-2ml培养好的菌液,离心收集,弃上清。加入300ul 裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5-10min。
2)霉素(孢子也可相同处理):取50-100mg菌丝,加300ul裂解液,用玻璃研磨器适当研磨分散菌丝,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约30min。
3)大型真菌(如蘑菇等):称取50-100mg样品,倒入适量的液氮,立即研磨重复3 次,使样品研成粉末(如无液氮,可加300ul裂解液后用玻璃研磨器适当研磨),加300ul裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5min。
2.加入10ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,55℃水浴消化,15-30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次。
3.12000转离心2min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀,可再次离心。
4.在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,55℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品Pai关键词:琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014,百奥莱博
F030229 HRP标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*HRP
ARB11394 人神经丝蛋白(NF)血清中含量检测 Human neurofilament protein,nf ELISA KIT
鞭毛染色液(改良Ryu法) 50ml|100ml
PY08-059 碱性蛋白胨水(APW) 225ml 20瓶/箱,用于霍乱弧菌选择性增菌培养
SJ0746 小鼠瘤细胞分离液
BTN120677 Southern封堵液(Nylon专用) Southern Blocking Buffer(Nylon)
PY01-155 核糖核酸酶A(100u/mg) 0.1克
BTN100810 超快蛋白银染试剂盒 Rapid Silver Stain for Protein
85-86-9 苏丹Ⅲ
ARB13426 鸡三碘甲状腺原氨酸(T3)酶联免疫定量检测 Chicken tri-iodothyronine,t3 ELISA KIT
BL0956 胶体金标记兔抗鸡IgG抗体
HC0339 雷勃大容量电动移液器
T4 DNA连接酶 Sodium succinate dibasic hexahydrate 9015-85-4
2′-脱氧肌苷 Ruodium (Ⅲ) Chloride Hydrate 890-38-0
BL1167 全血基因组DNA提取试剂盒
DNA中和缓冲液Ⅰ 100ml
CYB163043 羊抗大鼠IgG(全分子)-FITC
ARB13558 兔子内皮素1(ET-1)Elisa方法检测 Rabbit endothelin 1,et-1 ELISA KIT
PY02-310 含糖肉汤琼脂培养基 250克
36051-31-7 5′-三磷酸鸟苷三钠 Guanosine5-Tiphosphate (GTP)
ARB11774 人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)酶标法分析 Human a disintegrin and metalloprotease 10,adam10 ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司专业生产DNA纯化产品,欢迎来电咨询选购琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品Pai。
您可能感兴趣的产品
相关产品
-
供应商产品推荐
-
信息说明
本产品信息由(北京百奥莱博科技公司)为您提供,内容包括(XH014 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒)的品牌、型号、技术参数、详细介绍等;如果您想了解更多关于(XH014 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒)的信息,请直接联系供应商,给供应商留言。若当前页面内容侵犯到您的权益,请及时告知我们,我们将马上修改或删除。
官方微信
仪器网微信公众号
扫码获取最新信息
在线客服
咨询客服
电话客服: 400-822-6768 工作日: 9:00-18:00
订阅商机
仪采招微信公众号
采购信息一键获取海量商机轻松掌控
|