AAT启动子荧光素酶报告基因质粒 克隆与表达

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名称：AAT启动子荧光素酶报告基因质粒 克隆与表达
编号：YT456
英文名：AAT-promoter-luc Reporter gene plasmid
品Pai：百奥莱博
规格：1μg
AAT启动子报告基因质粒是用于检测AAT promoter转录活性水平的报告基因质粒。AAT启动子质粒是以pGL6质粒为模板，在其多克隆位点插入了human AAT的启动子序列，可以高灵敏度地检测AAT promoter的激活水平。

AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase，也简称为A1AT)，又称serine peptidaseinhibitor,clade A,member 1或serine proteinase inhibitor,clade A,member 1(简称SERPINA1)，是一种可以被分泌到细胞外的丝氨酸蛋白酶YZ剂，可以YZelastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。

pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到ZD。

AAT启动子质粒的主要信息如下：

Base pairs	6445
AAT promoter	20-900
luc2 reporter gene	946-2598
SV40 late poly(A) signal	2633-2854
SV40 early enhancer/promoter	2902-3320
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	3345-4139
Synthetic poly(A) signal	4164-4212
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	4279-4298
ColE1-derived plasmid replication origin	4536
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	5327-6187
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	6292-6445
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	6394-6413

AAT启动子质粒的图谱如下：



使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. AAT启动子可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。
3. 可以激活AAT promoter的试剂，可以用作AAT启动子报告基因检测时的阳性对照。

储存条件：-20℃。

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ARB11963 大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)含量分析 Rat b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
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·甲基绿染色液
编号：YT166
英文名称：Methyl Green Staining Solution
规格：100ml
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的DNA结合，从而产生细胞核染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。

注意事项：
1. 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2. DY次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

储存条件：室温，有效期一年。

·Hoechst 33342细胞蓝色荧光染料
编号：YT894
英文名称：Hoechst 33342
规格：10mg
本Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

Hoechst 33342的ZD激发波长为346nm，ZD发射波长为460nm；Hoechst 33342和双链DNA结合后，ZD激发波长为350nm，ZD发射波长为461nm。

Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20mg/ml。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33342工作浓度为0.5-10μg/ml。

CAS：23491-52-3
分子式：C27H28N6O·3HCl·3H2O
分子量：615.99

注意事项：
1. 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(YT097)可以向百奥莱博订购。

储存条件：-20℃避光，有效期一年。


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·NF-κB凝胶迁移探针(1.75μM)
编号：YT228
英文名称：NF-κB Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的NF-κB consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的NF-κB结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应，每次标记的探针可以测定约100个样品；或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争，可以进行30-60个冷竞争反应。

NF-κB consensus oligo的序列如下：
5"-AGT TGA GGG GAC TTT CCC AGG C-3"
3"-TCA ACT CCC CTG AAA GGG TCC G-5"

本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记，也可以用于生物素标记。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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