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北京百奥莱博专业生产供应细胞转染质粒提取试剂盒促销,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:细胞转染质粒提取试剂盒促销
英文名:Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
编号:ALH083
品Pai:百奥莱博
规格:20次
本试剂盒适用于中量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备。用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯*(代"仿")抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达3μg/μl。
试剂盒组份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
杂质清除剂A-——————————1.5ml
杂质清除剂B-——————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml
试剂盒特点:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代"仿")等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从50-70 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取100μg -250μg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高,浓度高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。
注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔,应该使用剪大了开口的吸头,防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后,可能看不到明显沉淀。如未见沉淀,担心DNA 丢失,可保留上清液,待完成全部操作后电泳鉴定,以确定是否获得终产物(数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上,可能无法看到明显团块)。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2 条或者多条DNA 条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道确切大小。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:无内毒素质粒中量提取试剂盒|细胞转染用质粒制备试剂盒|高纯度质粒重量提取试剂盒|细胞转染质粒提取试剂盒|无内毒素培养菌质粒提取试剂盒
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