供应商： 北京百奥莱博科技有限公司 数量： 820 英文名： M-MLV (H-) Reverse Transcriptase 保质期： 长期 保存条件： -20℃
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SY0293型逆转录酶北京厂家现货的品Pai：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多逆转录酶等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称：逆转录酶
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
本品适用于DY链cDNA合成，cDNA 片段长度ZG可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性，该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因而在cDNA DY条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA，本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶，即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase，与M-MuLV相比，不仅改善了模板RNA可能被降解情况，且具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。
注意事项
1）为保证反转录成功，建议使用高质量的RNA样品。
2）请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
3）如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5min，冰上冷却，短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用方法
1DY条链cDNA合成（以20μl反应体系为例）
1.1 按照表【1】配制反应体系
| RNase free ddH2O | to 20μl |
| 5×Reaction Buffer | 4 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μl) | |
| or Random hexamer (0.1μg/μl) | |
| or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM) | 1 μl |
| RNase inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
| M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 1 μl |
| 模板RNA | Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng |
| 表1 cDNADY条链合成反应体系表 | |
| cDNA模板 | 2μl | 依需要调整 |
| Forward Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| Reverse Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| 10×Taq Buffer(含Mg2+) | 5 μl | 1× |
| 2.5mM dNTPs | 4μl | 0.2 mM |
| Taq DNA Polymerase | 0.5μl | 2.5units |
| ddH2O to final volume | 50μl | / |
| 表2 RT-PCR反应体系表 | ||
| 编号 | 名称 |
| SY0613 | 重组人IFN-β1b |
| SY0122 | C-REL-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0041 | 脱氧腺苷三磷酸溶液(100 mM)(dATP) |
| SY0547 | 支原体去除试剂(1000×) |
| SY0039 | 2×即用型PCR预混溶液(热启动高保真) |
| SY0591 | 内质网红色荧光探针(活细胞) |
| SY0020 | 定点突变试剂盒 |
| SY0354 | 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8 |
| SY0212 | Elk1-GFP报告基因质粒 |
| SY0266 | RNaseYZ剂(鼠源) |
| SY0260 | 双链DNA定量检测试剂盒 |
| SY0175 | GRE-GFP报告基因质粒 |
| SY0254 | 2×RNA上样缓冲液(不含溴化乙锭) |
| SY0146 | STAT3-Luc 报告基因慢病毒颗粒 |
| SY0259 | 双链DNA(dsDNA)定量试剂 |
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| SY0086 | ER-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0397 | GST标签蛋白纯化预装柱 |
| SY0362 | 丙烯酰胺 |
| SY0228 | RXR-GFP报告基因质粒 |
| SY0107 | PU.1-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0194 | TCF/LEF1-GFP报告基因质粒 |
| SY0198 | E2F-GFP报告基因质粒 |
| SY0151 | 慢病毒报告基因阴性对照 |
| SY0731 | DyLight 405标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| SY0627 | rac-GR24 独脚金内酯 |
| SY0640 | HRP标记小鼠抗β-Tubulin单克隆抗体 |
| SY0163 | PPARγ-GFP报告基因质粒 |
| SY0190 | Oct4-GFP报告基因质粒 |
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| SY0336 | 脱氧胆酸钠 |
| SY0639 | 兔抗β-Tubulin多克隆抗体 |
| SY0196 | Myc-GFP报告基因质粒 |
| SY0650 | 小鼠抗Myc-tag单克隆抗体 |
| SY0533 | 淋巴细胞分离液1.084 |
| SY0677 | Alexa Fluor 680标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| SY0442 | 人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白 |
| SY0676 | R-藻红蛋白标记山羊抗兔IgG(H+L)F(ab)2片段 |
| SY0501 | Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒 |
| SY0221 | MEF3-GFP报告基因质粒 |
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